Tijdens dunnelaagchromatografie plaatst een technicus vlekken van een chemisch mengsel op een vlakke plaat bedekt met een laag absorberend materiaal en zit vervolgens het onderste gedeelte van de plaat in oplosmiddel. Terwijl oplosmiddel de plaat omhoog beweegt, bewegen chemicaliën in het mengsel met verschillende snelheden mee omhoog, zodat ze uit elkaar gaan. Deze test bepaalt welke chemicaliën in een mengsel zijn door de reissnelheid van onbekenden te vergelijken met bekende normen. De resultaten kunnen echter worden beïnvloed door vele factoren.

TL; DR (te lang; niet gelezen)

Retentiefactorwaarden in dunne-laag-chromatografie worden beïnvloed door het absorptiemiddel, de oplosmiddel, de chromatografieplaat zelf, applicatietechniek en de temperatuur van het oplosmiddel en de plaat.
Retentiefactoren

De retentiefactor voor een chemische stof tijdens dunnelaagchromatografie is een maat voor hoe ver deze omhoog de plaat beweegt in reactie op de beweging van het oplosmiddel. Aangezien de absolute beweging van de chemische stof afhankelijk is van hoe ver het oplosmiddel reist, berekent u retentiefactorwaarden in verhouding tot de mate van beweging van het oplosmiddel. De retentiefactor voor een chemische stof is de verticale afstand verplaatst door de chemische stof vanaf de plek waar het oorspronkelijk op de plaat werd aangebracht, gedeeld door de afstand afgelegd door het oplosmiddel - gemeten vanaf hetzelfde startpunt.
Thin Layer Chromatography Plate

De dunne-laag-chromatografieplaat zelf kan de verkregen retentiefactorwaarde voor een bepaalde chemische stof beïnvloeden. Dunne-laag-chromatografieplaten kunnen worden gecoat met een verscheidenheid aan absorberende vaste stoffen; meestal silica of aluminiumoxide. Omdat de retentiefactor is gebaseerd op de relatieve affiniteit van de chemische stof voor het absorptiemiddel vergeleken met het oplosmiddel, kan het veranderen van het absorptiemiddel de retentiefactor aanzienlijk veranderen. Ook kan de dikte en uniformiteit van de absorberende laag van plaat tot plaat variëren, vooral als ze handgemaakt zijn. Deze factoren kunnen ook de retentiefactorwaarde voor chemicaliën veranderen.
Oplosmiddeleffecten Retentiefactoren

Aangezien het oplosmiddel de chemische stof op de plaat draagt, zal het gebruikte oplosmiddel ook een aanzienlijke invloed hebben op de retentiefactorwaarde voor de chemische stof. Een oplosmiddel dat een sterkere interactie heeft voor een bepaalde chemische stof, zal gemakkelijker elke affiniteit van de chemische stof voor de absorberende laag overwinnen en die chemische stof in een gegeven tijdsperiode verder verplaatsen. Mengsels van oplosmiddelen kunnen ook verschillende effecten hebben, afhankelijk van het aandeel van elk oplosmiddel.
Andere factoren

Er zijn een paar andere factoren die in sommige gevallen de retentiefactor kunnen beïnvloeden. De temperatuur van het oplosmiddel en de plaat kunnen kleine veranderingen aanbrengen, omdat het oplosmiddel bijvoorbeeld vaak de chemicaliën die het transporteert bij hogere temperaturen kan oplossen. De techniek van de technicus bij het aanbrengen van het monster op de plaat kan ook de retentiefactor veranderen. Het aanbrengen van te veel monsters kan resulteren in grote, diffuse banden van chemicaliën die op de plaat bewegen, waardoor het moeilijk is om de afstand die de chemische stof is getransporteerd nauwkeurig te meten.