Wetenschappers en technici moeten de concentratie van cellen in een suspensie vaak berekenen. Wanneer een patiënt bijvoorbeeld zijn bloed op het kantoor van een arts laat ophalen, kan het laboratorium bepaalde methoden gebruiken om te zoeken naar de hoeveelheid witte bloedcellen in een bepaald volume bloed. Dit geeft de arts veel informatie over de gezondheid van haar patiënt, vooral zijn immuunsysteem en of hij een infectie of een andere ziekte bestrijdt. Tests als deze kunnen op zoek gaan naar vele andere cellen in het bloed, evenals ruggemergvloeistof en andere lichaamsvloeistoffen, zoals het aantal zaadcellen in sperma voor vruchtbaarheidsdoeleinden. Wetenschappers berekenen ook celconcentraties van bacteriën, gisten en andere micro-organismen voor tal van doeleinden, variërend van ecologisch onderzoek tot industriële technologieën. Een van de meest voorkomende technieken wordt ook in veel college-biologielessen gegeven en gebruikt een apparaat dat een telkamer wordt genoemd.

Het monster verdelen

Voordat de celsuspensie de telkamer kan ingaan , het kan verdunning nodig hebben omdat het duizenden of miljoenen cellen kan bevatten. In dat geval kunnen de cellen redelijkerwijs niet worden geteld. Om het monster te verdunnen, gebruikt u een steriele pipet om tien microliter van de celoplossing in een reageerbuisje met 90 microliter verdunningsmiddel te plaatsen. Het type verdunningsmiddel hangt af van het type cel. Meng het goed. Deze oplossing is nu tien keer meer verdund dan het oorspronkelijke monster, dus de verdunningsfactor is 10 ^{-1. Label het. Herhaal dit meerdere keren, telkens met een steriele pipet, totdat de oplossing voldoende verdund is. Als je het een tweede keer hebt verdund, was de tweede reageerbuis 100 keer meer verdund dan de oorspronkelijke oplossing, dus de verdunningsfactor was 10 -2 enzovoort.}

De cellen tellen

Misschien moet u verschillende verdunningen proberen om de juiste verdunningsfactor voor de telkamer te bepalen. Een telkamer is in feite een zeer kleine, heldere, rechthoekige doos met een precieze diepte en een nauwkeurig raster dat aan de bovenkant is ingeschreven. Het is ook bekend als een hemocytometer, of soms een hemacytometer. Het doel is dat de suspensie voldoende verdund is, zodat wanneer ze in de telkamer worden bekeken, er geen cellen elkaar overlappen en ze op uniforme wijze over het rooster worden verdeeld. Pipetteer de verdunde suspensie die de cellen bevat in de put in de telkamer, waar deze zich door capillaire werking in de roosterkamer zal nestelen. Plaats de telkamer op het microscoopstadium en bekijk deze onder laag vermogen.

Het raster bevat vierkanten die zijn gemaakt van nog kleinere vierkanten. Selecteer ongeveer vier of vijf vierkanten, of hoe vaak u ook minimaal 100 cellen moet tellen, in een patroon naar keuze, zoals de vier hoeken en een middenvierkant. Als de cellen groot zijn, kunnen dit de grote vierkanten zijn, maar als de cellen klein zijn, kunt u in plaats daarvan de kleinere vierkanten kiezen.

Concentratie berekenen

Het specifieke volume van elk rastervierkant kan variëren door de telkamerfabrikant, maar vaak is de diepte van de kamer 0,1 millimeter, het oppervlak van de grote vierkanten 1 vierkante millimeter en het oppervlak van de kleinere vierkanten 0,04 vierkante millimeter. De grotere vierkanten hebben dan een volume van 0,1 kubieke millimeter. Stel dat u in dit voorbeeld een totaal van 103 cellen in vijf vierkanten telde en dat u het eerste monster verdunde tot de verdunningsfactor 10 ^{-2 was.}

Als elk rastervierkant een volume van 0,1 heeft kubieke millimeters en vijf werden geteld, vervolgens was het totale volume van de kamer die werd geteld 0,5 kubieke millimeter, en er waren 103 cellen. Verdubbeld om er 1 kubieke millimeter van te maken, zou het 206 cellen worden. Eén kubieke centimeter is gelijk aan 1 milliliter, wat een nuttige maat is voor vloeistoffen. Er zijn 1.000 kubieke millimeter in een kubieke centimeter. Dus als er een kubieke centimeter of een milliliter suspensie was geweest, zou je 206.000 (206 x 1.000) cellen hebben geteld. Dit is hoe het eruit ziet als een vergelijking:

Volume van raster square × aantal getelde squares = totaal volume van getelde schorsing

Aantal cellen ÷ volume van getelde schorsing = aantal cellen per millimeter cubed

Celgetal per millimeter in blokjes × 1000 = aantal cellen per millimeter

Onverdunde concentratie berekenen

U moet rekening houden met elke verdunning die wordt uitgevoerd om de initiële oplossing telbaar te maken onder de microscoop. In dit voorbeeld is de verdunningsfactor 10 ^{-2. Om de beginconcentratie van de oplossing te berekenen:}

Aantal cellen per milliliter ÷ verdunningsfactor = celconcentratie

Voor dit voorbeeld is het aantal cellen per milliliter 206.000 en dat wordt 10 gedeeld door ^{-2 (0.01) geeft een celconcentratie van 20.600.000 cellen per milliliter in het eerste monster.}