Enterobacter aerogenes en andere soorten Enterobacteriaceae zijn gemakkelijk te identificeren met behulp van de API-20E-testset. Deze kit, vervaardigd door bioMeriuex Inc., bevat 20 mini-buizen of wells voor de test. De test bestaat uit het inoculeren van een zuivere bacteriesuspensie in de testwells en het lezen van de kleurreacties die optreden. Identificatie is afhankelijk van het converteren van de resultaten van deze kleurreacties in een zevencijferige code die bekend staat als de Analytical Profile Index. Door deze code te vergelijken met de database van de fabrikant, wordt het organisme geïdentificeerd.

Isoleer het organisme dat u wilt identificeren op een specifiek voedingsmedium voor Enterobacteriaceae. Gebruik de API 20E-testkit alleen met zuivere culturen en niet rechtstreeks op gemengde kweekmonsters.

Open een ampul met 5 ml natriumchloride 0,85 procent medium. Verwijder een enkele kolonie van een 18- tot 24-uurs isolatieplaat met een pipet en voeg deze toe aan de ampul. Meng om een ​​homogene suspensie te verkrijgen. Gebruik deze suspensie zodra u klaar bent met voorbereiden.

Plaats een incubatiekast die bestaat uit honingraatputten in een lade met een deksel. Open de doos en voeg 5 ml gedemineraliseerd of gedestilleerd water in de bakjes van de bak. Pak de strip uit die is meegeleverd met de API 20E-testkit en plaats deze in de incubatiekast.

Vul de tube en de cupule van de wells gemarkeerd met "GEL", "VP" en "CIT" met de suspensie die u heb voorbereid. Vul de bacteriële suspensie in de resterende wells in de buis, maar niet in de cupule. Voeg minerale olie toe aan de wells met de markering "ADH", "ODC", "LDC", "URE" en "H2S" om een ​​anaerobe omgeving te creëren.

Bedek de incubatiekast met het deksel en incubeer bij een temperatuur tussen 34 en 38 graden Celsius gedurende 18 tot 24 uur.

Neem de putten in acht en noteer de reacties op het resultatenblad. Op voorwaarde dat er minimaal drie tests positief zijn, ga dan verder met de kleurreacties met behulp van de chemische testoplossingen of reagentia die bij de kit zijn geleverd. Voeg één druppel TDA-reagens toe aan de goed gemarkeerde "TDA" en laat elk VP1- en VP2-reagens vallen in een goed gemarkeerde "VP." Als minder dan drie tests positief zijn, incubeer de strips dan nog eens 24 uur voordat u deze reagentia toevoegt.

Houd rekening met de kleurveranderingen die in de wells worden geproduceerd. Een roodachtige bruine kleur in TDA duidt op een positieve reactie. Wacht 10 minuten nadat u reagentia uit de set hebt toegevoegd in VP1 en VP2. Beschouw een rode of roze kleur als positief en een bleekroze kleur die na 10 minuten als negatief verschijnt.

Voeg een enkele druppel JAMES-reagens uit de testkit toe aan de goed aangegeven "IND". Beschouw een roze kleur in de gehele cupule als een positieve reactie.

Voer de oxidase-test uit zoals gespecificeerd door de fabrikant van de set en noteer de resultaten samen met de resultaten van de vorige 20 tests.

Gebruik de leestabel die is meegeleverd met de testkit om waarden toe te wijzen voor de reacties die zijn waargenomen in elk van de testputten. Voeg deze waarden toe zoals voorgeschreven om het zevencijferige profielnummer te verkrijgen.

Voer dit zevencijferige profielnummer in de database van de fabrikant van de set via een telefoon met druktoetsen. Wacht tot de identificatie door de database is ontvangen. Als het profielnummer geen specifieke resultaten oplevert, voert u de aanvullende tests uit die zijn opgegeven door de fabrikant van de set.