Een enzym is een eiwit dat de chemische reacties katalyseert (verhoogt de snelheid van). De optimale temperatuur van de meeste enzymen, of de temperatuur waarbij enzymen het best reacties vergemakkelijken, ligt tussen 35 en 40 graden Celsius. Verhoging van de temperatuur in dit venster verhoogt de reactiesnelheid, omdat het moleculen prikkelt en de snelheid verhoogt waarmee enzymen /reactanten botsen en reageren om een ​​product te maken. Een te hoge temperatuur kan echter het enzym denatureren en het helemaal niet laten werken.

Bepaal de optimale enzymtemperatuur door de reactie te verwarmen met oneindig kleine hoeveelheden en kleine steekproeven van de reactie te nemen, om te bepalen wanneer de maximale snelheid product produceert.

Selecteer een methode. Bepaal hoe u de concentratie van uw product op verschillende punten in het experiment gaat meten. U kunt bijvoorbeeld de concentratie van veel producten meten met behulp van een spectrofotometer en de concentratie berekenen aan de hand van de absorptie, of door fluorescentie en de berekende concentratie uit fluorescentie te meten.

Stel uw experiment in. Plaats uw reactanten en enzym in een kleine container met een deksel, zoals een scintillatieflesje. De reactie zal beginnen. Plaats de scintillatiefles in een grotere beker met water op kamertemperatuur. Plaats de beker op een verwarmingsplaat. Plaats een thermometer in de beker. Hiermee kunt u de temperatuur van de reactie op verschillende punten meten.

Neem een ​​100 microliter monster van de reactie bij kamertemperatuur, ongeveer 25 graden Celsius. Zet de verwarmingsplaat aan. Neem bij verschillende temperaturen tussen 30 en 40 graden Celsius (30,5, 31, 31,5, enz.) Monsters van 100 microliter van uw reactie.

Bepaal de concentratie van uw product bij elke temperatuur. Wanneer de temperatuur boven 40 graden Celsius stijgt, ziet u een afname in de snelheid waarmee substraat wordt omgezet in product, omdat het enzym wordt gedenatureerd. Het punt waarop het product met de maximale snelheid wordt geproduceerd, is het punt waarop de temperatuur optimaal is.