Science >> Wetenschap >  >> Biologie

Wat is de behoefte aan centrifuge in DNA -isolatie?

Centrifugatie speelt een cruciale rol in DNA -isolatie door het scheiden van verschillende componenten van een monster op basis van hun dichtheid . Hier is hoe het in verschillende fasen wordt gebruikt:

1. Cellysis:

* Open cellen breken: Centrifugatie wordt gebruikt om open cellen (zoals bloedcellen, bacteriën of plantencellen) te breken om het DNA af te geven. Dit kan worden gedaan via fysieke methoden zoals vortexing of sonicatie, maar centrifugatie helpt het celafval te scheiden van het vrijgegeven DNA.

* Celafval verwijderen: Na lysis wordt het monster gecentrifugeerd met een relatief lage snelheid. Zwaardere celafval, organellen en eiwitten gaan zich op de bodem en vormen een pellet, terwijl het DNA in het supernatant blijft (de vloeistof boven de pellet).

2. DNA -neerslag:

* DNA scheiden van oplossing: Nadat het DNA uit de oplossing is neergeslagen (meestal met behulp van ethanol of isopropanol), wordt centrifugatie met een hogere snelheid gebruikt om het DNA te pellet. De pellet wordt vervolgens gewassen met een oplossing zoals ethanol om eventuele resterende verontreinigingen te verwijderen.

* concentratie: Centrifugatie kan ook worden gebruikt om het DNA te concentreren door een groot volume oplossing in een kleiner volume te draaien. Dit is handig bij het werken met kleine hoeveelheden DNA.

3. Zuivering:

* Verzuimen verwijderen: Centrifugatie wordt gebruikt om verontreinigingen zoals eiwitten, lipiden en RNA te verwijderen, die vaak naast DNA aanwezig zijn. Verschillende centrifugatieprotocollen met specifieke snelheden en buffers worden gebruikt om deze verontreinigingen selectief te scheiden.

Samenvattend:

* Celverstoring en puinverwijdering: Centrifugatie scheidt celafval van het vrijgegeven DNA.

* DNA -neerslag en concentratie: Centrifugatie pellets het DNA en helpt het te concentreren.

* zuivering: Centrifugatie scheidt verontreinigingen van het DNA, wat leidt tot een reiniger en meer geconcentreerd DNA -monster.

Door een combinatie van deze technieken te gebruiken, speelt centrifugatie een cruciale rol bij het waarborgen van de succesvolle isolatie en zuivering van DNA.