science >> Wetenschap >  >> Biologie

Wat is opsomming in de microbiologie?

Microbiologie is de studie van micro-organismen: microscopische of nauwelijks zichtbare eencellige levensvormen zoals bacteriën, archaea, protozoën en sommige schimmels, en zelfs enkele extreem kleine meercellige planten, dieren en schimmels. Microbiologen bestuderen ook levensechte niet-organismen zoals fenomenen zoals virussen, prionen, viroïden en virionen. "Microbe" is een verzamelnaam voor al deze entiteiten. Opsomming in de microbiologie is de bepaling van het aantal individuele levensvatbare microben in een monster; er zijn vier basistechnieken mogelijk.
Telculturen

Een directe maat voor microbiële telling is het standaard aantal platen, ook wel een levensvatbare telling genoemd. Voor deze telling kweek je een monster door het te verdunnen, het op platen van kweekmedium te plaatsen en ze een bepaalde tijd te incuberen. Vervolgens tel je het aantal kolonies en gebruik je dit aantal om het oorspronkelijke aantal microben in de steekproef af te leiden. Technisch gezien geeft een plaatentelling niet het aantal individuele microben, maar veeleer "kolonievormende eenheden", omdat je niet zeker weet of elke kolonie eigenlijk uit een enkele microbe of uit een kleine groep microben kwam . Deze tellingen worden echter als zeer nauwkeurig beschouwd voor het schatten van het aantal microben in originele monsters. Nadelen zijn dat deze test tijd- en ruimtebesparend is en gespecialiseerde apparatuur vereist die correct moet worden voorbereid.
Individuele tellingen

Directe microscopische tellingen, ook wel totale celtellingen genoemd, zijn een andere vorm van directe telling. Eerst verdeel je een monster in een aantal kamers van gelijke grootte. Vervolgens bepaal je het gemiddelde aantal microben per kamer door een aantal of alles onder een microscoop te tellen. Ten slotte gebruikt u dit gemiddelde om het aantal in de oorspronkelijke eenheid te berekenen. Het grote nadeel voor directe microscopische tellingen is dat het moeilijk is om levende microben van dode te onderscheiden, dus deze methode geeft mogelijk geen nauwkeurige haalbare opsomming.
Lichtstralen, wolken van microben

Troebelheidstesten zijn vormen van indirecte opsomming. Troebelheid is de troebelheid van een vloeistof. Bij turbidimetrische meting brengt u een monster in oplossing, meet de troebelheid van de nieuwe oplossing door er licht doorheen te schijnen met een spectrofotometer en schat vervolgens het aantal levende microben dat nodig zou zijn om het waargenomen troebelheidsniveau te produceren. Het nadeel hier is dat iemand al een groot aantal standaardplaatentellingen van de microbe in kwestie heeft gedaan om monsteroplossingen met variërende troebelheid te maken, zodat u een standaard heeft om uw huidige monster tegen te meten. Je moet ook oppassen dat je je monster niet al te sterk concentreert, omdat een turbidimetrische telling alleen nauwkeurig is als geen enkele microben in het monster andere blokkeert. In een visuele turbiditeitsvergelijking vergelijkt u de troebelheid van uw monster met de troebelheid van een eenheid van dezelfde grootte en bekende microbiële telling, en schat u een opsomming op basis van deze vergelijking.
Indirecte resultaten

Twee andere vormen van indirecte opsomming zijn massabepaling en meting van microbiële activiteit. Voor een massa-opsomming weeg je de hoeveelheid biologische stof in je monster, vergelijk je dit gewicht met een standaardcurve voor bekende microbiële tellingen en schat je het oorspronkelijke microbiële getal uit deze vergelijking. Voor een meting van de microbiële activiteit meet u de hoeveelheid biologisch product in uw monster, zoals metabolisch afval, en vergelijkt u deze vervolgens met een standaardcurve voor bekende tellingen en schat u uw opsomming uit deze vergelijking.