Wetenschap
Experimentele resultaten van immuungekleurde cellen met behulp van de microwell-array met barrières. Krediet:Soo Hyeon Kim
De afgelopen jaren zijn er verschillende screeningstesten voor baarmoederhalskanker ontwikkeld. Eén techniek maakt gebruik van immunofluorescentiekleuring om de niveaus van biomarkers te bepalen om aan te geven dat een cel HPV-gerelateerde kankergroei ondergaat. Immunokleuring voor deze eiwitten, echter, tijdrovend kan zijn. Een nieuwe benadering, besproken in deze week Biomicrofluïdica , lijkt een manier te bieden om cervicale cellen efficiënter te screenen met immunokleuring, inspiratie putten uit een onwaarschijnlijke bron:Pachinko.
Onderzoekers hebben een nieuw apparaat gedemonstreerd dat afzonderlijke cellen kan vangen en analyseren voor HPV-gerelateerde screening op baarmoederhalskanker. Het apparaat maakt gebruik van een reeks putten voor afzonderlijke cellen om in te zitten, elk met microscopisch kleine elektroden aan de onderkant, en een elektrisch fenomeen dat bekend staat als diëlektroforese om die cellen op te vangen voor analyse.
Het ontwerp, zei auteur Soo Hyeon Kim, werd geïnspireerd door het spel Pachinko, waarin kleine stalen balletjes een bord bezaaid met koperen pinnen naar manden navigeren die verschillende prijzen aanduiden.
"Grote uitdagingen waren het vangen van gesuspendeerde cellen op eencellig niveau en het analyseren ervan met behulp van antilichamen met minimaal verlies van gevangen cellen, " zei hij. "Door gewoon een kleine structuur achter de microwell te plaatsen, de cellen bleven efficiënt in de microwells, zelfs met de onstabiele stroom die werd gebruikt voor de afgifte van reagentia."
Immunokleuring omvat het maken van antilichamen die een cel kunnen binnendringen en binden aan doeleiwitten en fluoresceren. Cellen die hogere niveaus van twee eiwitten bevatten die verband houden met cellulaire groei en proliferatie, genaamd p16 en Ki-67, geven op betrouwbare wijze de aanwezigheid van kankercellen aan.
dergelijke technieken, Hoewel, vereisen vaak dat onderzoekers één cel tegelijk zorgvuldig voorbereiden. Dit kan bijzonder problematisch zijn, omdat soms niet alle cellen van hetzelfde kankergezwel hetzelfde abnormale gedrag vertonen.
De aanpak van de groep, zogenaamde elektroactieve microwell-array met barrières (EMAB), is een van de eersten die elektrostatische krachten van de elektroden van elk putje combineert met een fysieke structuur die fungeert als een Pachinko-mand voor elke cel.
Tijdens experimenten, het apparaat ving effectief 98% van de cellen die er doorheen gingen en kon 92% van hen vasthouden voordat ze werden geanalyseerd met behulp van immunofluorescentiekleuring.
Kim zei dat het combineren van EMAB met p16/Ki67 dubbele immunokleuring een nuttig hulpmiddel zou kunnen zijn om moleculair bewijs te leveren dat pathologen zou kunnen helpen bij het stellen van een diagnose van baarmoederhalskanker. Hij hoopt dat de techniek evolueert en kan worden aangepast voor gebruik bij de diagnose van eierstokkanker en circulerende tumorcellen.
Het volgende project van de groep is om het apparaat in de kliniek te gebruiken.
Wetenschap © https://nl.scienceaq.com