Science >> Wetenschap & Ontdekkingen >  >> Biologie

Nauwkeurige celtelling onder de microscoop:technieken, apparatuur en toepassingen

Door Kevin Beck | Bijgewerkt op 30 augustus 2022

Cellen zijn de fundamentele eenheden van het leven, die elk DNA, een membraan, cytoplasma en ribosomen bevatten. Ze vormen de basis van alle levende organismen – van eencellige bacteriën tot complexe meercellige eukaryoten. Het begrijpen en kwantificeren van cellen is essentieel in onderzoek, diagnostiek en de volksgezondheid.

Wat zijn cellen?

Cellen bevatten vier kerncomponenten:DNA (de genetische blauwdruk), een plasmamembraan, cytoplasma en ribosomen voor eiwitsynthese. Prokaryoten (bacteriën en archaea) hebben geen membraangebonden organellen, terwijl eukaryoten (dieren, planten, schimmels) organellen bezitten zoals mitochondriën en chloroplasten. Deze structurele verschillen maken eenvoudige identificatie onder een microscoop mogelijk.

Waarom de celdichtheid tellen?

Door de celdichtheid te meten weten we of een monster schadelijke microben bevat, en zo ja, hoeveel. Deze gegevens zijn bepalend voor beslissingen op het gebied van klinische diagnostiek, voedselveiligheid en milieumonitoring. Zuivelproducenten moeten bijvoorbeeld voldoen aan de wettelijke limieten voor bacteriële belasting om de productveiligheid te garanderen.

Soorten microscopen

De samengestelde lichtmicroscoop, die twee objectieflenzen gebruikt, biedt een hoge vergroting voor analyse van afzonderlijke cellen, maar een lagere resolutie, waardoor deze ideaal is voor het tellen van individuele cellen. Een dissectie of stereomicroscoop biedt daarentegen een lagere vergroting met een hogere resolutie, geschikt voor het onderzoeken van celaggregaten. Het selecteren van de juiste microscoop hangt af van het monstertype en het vereiste gezichtsveld.

Celtelmethoden

In de microbiologie worden drie belangrijke methoden gebruikt:

  • Plaattelling – Een monster verdunnen, op agar verspreiden en kolonies tellen om levensvatbare cellen te schatten.
  • Directe celtelling – Handmatig cellen tellen in een bekend volume, vaak met behulp van geometrische berekeningen.
  • Troebelheidsmeting – Beoordelen van lichtverstrooiing om de celconcentratie te schatten, nuttig voor culturen met hoge dichtheid.
Deze technieken zijn afhankelijk van nauwkeurige verdunningen en wetenschappelijke notatie vanwege het enorme scala aan organismeaantallen.

Een microscooptelkamer voorbereiden

Een hemocytometer, oorspronkelijk ontworpen voor het aantal bloedcellen, biedt een gestandaardiseerde kamer voor nauwkeurige celtelling. Reinig vóór elk gebruik de kamer om besmetting te elimineren en reproduceerbare resultaten te garanderen. Hoewel er geautomatiseerde tellers bestaan, blijft een goed onderhouden hemocytometer voor veel laboratoria een gouden standaard.