Wetenschap
Evaluatie van P22-mAbs door Western-blot-analyse en blokkerende enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA). A) Western-blot-analyse van de specificiteit van de P22-monoklonale antilichamen (mAbs) voor het beoogde P22-eiwit. De blokletter tussen twee cijfers in de benedenhoek van elke afbeelding, staat voor de naam van mAb, KDa =kilo Dalton, M =marker, Lane-1 =recombinant P22-eiwit geladen met 15 µl in een concentratie van 1 mg/ml en Lane- 2 =maltose bindend eiwit (MBP) als negatieve controle. Deze resultaten toonden aan dat alle mAb's zeer specifiek waren en het MBP-gelabelde P22-eiwit herkenden bij het verwachte gewicht van ongeveer 66 KDa. B) Evaluatie van zeven P22-mAbs (3B7, 3F6, 3F7, 3F8, 3E9, 4A6 en 4B6) voor hun toepassing bij het blokkeren van ELISA met behulp van zes positieve en vier negatieve varkensserummonsters voor het Afrikaanse varkenspestvirus (ASFV) en allemaal werden geremd om hun met doelwit beklede antigeen te binden door de positieve serummonsters met een gemiddelde PI> 92%. Gegevens vertegenwoordigen het gemiddelde van de resultaten van drie onafhankelijke experimenten. Krediet:Bioveiligheid en gezondheid (2022). DOI:10.1016/j.bsheal.2022.04.002
Afrikaanse varkenspest (AVP) is een zeer besmettelijke en dodelijke ziekte bij varkens. Vanwege de complexiteit van het AVP-virus (ASFV) en verschillende klinische vormen van de ziekte, is een breed scala aan zeer effectieve en robuuste serodiagnostische tests vereist.
Het gebruik van de meest antigene ASFV-eiwitten is zeer cruciaal voor het verbeteren van serodiagnostische tests. Momenteel zijn slechts enkele zeer antigene recombinante eiwitten getest en gevalideerd voor gebruik als reagentia in serodiagnostische ASF-assays. Tot nu toe zijn drie ELISA-kits goedgekeurd op basis van de recombinante eiwitten P72, P30 en PP62.
In een nieuwe studie gepubliceerd in Biosafety and Health op basis van het recombinante P22-eiwit is een zeer gevoelige, specifieke en snelle op P22-monoklonale antilichaam gebaseerde blokkerende ELISA-test (mAb-bELISA) ontwikkeld om serumantilichamen te detecteren die zijn geïnduceerd door genotype I en II ASFV's om ASFV-antilichamen te detecteren. In totaal werden 806 varkensserummonsters getest om de prestatie van de diagnostische test te evalueren. De test kon ASFV-antilichamen al 9 dagen na infectie detecteren.
Op basis van deze studie kan de op nieuwe P22-mAb gebaseerde bELISA-assay worden gebruikt voor snelle en nauwkeurige detectie van antilichamen tegen AVP, die een waardevolle rol zullen spelen bij de inperking en preventie van AVP als alternatief voor andere serologische diagnostische methoden. Deze studie zal onderzoekers ook helpen om het immunogene belang van het P22-eiwit bij ASFV-infectie verder te onderzoeken. + Verder verkennen
Wetenschap © https://nl.scienceaq.com