Fosfaatbindingen verbinden zich met de 5'-hydroxylgroep van één nucleotide met de 3'-hydroxylgroep van het volgende nucleotide in een polynucleotideketen. Via deze bindingen worden de nucleotiden met elkaar verbonden om een ruggengraat te vormen, die het nucleïnezuur zijn structurele integriteit geeft en de overdracht van genetische informatie mogelijk maakt. Het specifieke patroon en de sequentie van fosfaatbindingen zijn essentieel voor het goed functioneren van nucleïnezuren en spelen een cruciale rol in verschillende cellulaire processen, waaronder DNA-replicatie, transcriptie en eiwitsynthese.