Agar is een geleiachtige substantie afgeleid van de gezuiverde celwanden van rode algen. Het wordt toegevoegd aan microbiologische media, die materialen zijn waarop micro-organismen in laboratoria worden gekweekt, om een ​​meer solide structuur aan de stof te geven. Agar heeft geen voedingswaarde, dus wanneer wetenschappers het gebruiken om micro-organismen te kweken, voegen ze verschillende voedingsstoffen toe om de bacteriegroei in petrischalen of reageerbuizen te verhogen. Wanneer onderzoekers bacteriën in een reageerbuis bewaren, wordt dit een agarhoek genoemd omdat het vloeibare groeimedium stolt terwijl de buis in een gekantelde positie is. Een schroefdop bovenaan op de helling voorkomt dat de agar uitdroogt.

Mediumpreparaat

Het medium is anders op schimmels voorbereid dan petrischalen. Sterilisatie wordt gedaan met de agar in de buizen; petrischalen worden vooraf gesteriliseerd voordat gesteriliseerde agar erin wordt gegoten. Meet de hoeveelheid water die je nodig hebt en doe het in een Erlenmeyer-kolf. Verwarm het op een fornuis tot het bijna kookt. Voeg indien nodig andere ingrediënten toe en roer het mengsel langzaam en constant totdat ze oplossen. Deze ingrediënten kunnen bestaan ​​uit rundvleesextract, pepton en pH-buffers, afhankelijk van het type micro-organisme dat wordt gekweekt.

Voeg de agar toe

Meng het met een kleine hoeveelheid voordat u het gedehydrateerde agarpoeder toevoegt. van koud gedestilleerd water om klonteren te voorkomen. Wees voorzichtig bij het toevoegen van agar aan de hete vloeistof, omdat deze kan schuimen en de pot kan overstromen. Voeg tegelijkertijd kleine hoeveelheden agar toe en roer om de agar gelijkmatig te verdelen. Zet het vuur uit wanneer het mengsel begint te stomen, voordat het kookt.

Sterilisatiebuizen

Plaats de niet-afgetopte reageerbuizen op een reageerbuisrek. Vul de reageerbuizen door ongeveer 5 milliliter - ongeveer 0,17 ounce of 1 theelepel - van de gesmolten agar uit de pot over te brengen met behulp van een steriele pipet. Klep elk van de reageerbuizen losjes, omdat de agar niet gesteriliseerd zal worden als ze goed zijn afgedicht. Steriliseer alle buizen in een autoclaaf gedurende ongeveer 25 minuten bij 121 graden Celsius of 250 graden Fahrenheit.

Bewaar in een schuine stand

Als de agar nog heet is, kantelt u de rackhouder voorzichtig de reageerbuizen op een stevig oppervlak of een dik boek, waarbij ervoor wordt gezorgd dat het medium in de buizen zich op een schuine positie ten opzichte van de reageerbuizen bevindt. Laat het medium afkoelen en stollen onder deze hoek, waardoor het oppervlak van de agar groter wordt. Draai de doppen van de reageerbuisjes vast nadat de agar is afgekoeld. De hellingen zijn klaar voor gebruik als de agar is gestold. Ze kunnen op kamertemperatuur worden bewaard of in de koelkast worden bewaard voor toekomstig gebruik.

Inoculeren de helling

Inoculeren de helling door cellen over te brengen met een entcircus van een micro-organisme met één kolonie op een plaat naar het oppervlak van de helling. Verplaats de lus over het oppervlak van de helling en herhaal de buizen. Incubeer de inslag tot er tekenen zijn van groei, zet de buis dan in de koelkast.