science >> Wetenschap >  >> Biologie

Hoe CFU uit verdunning te berekenen

CFU staat voor Colony Forming Units, een term voor microbiologie die wordt gebruikt om te kwantificeren hoeveel bacteriën er in een oplossing voorkomen. Afhankelijk van de concentratie van uw monster, moet u meerdere verdunningen uitvoeren en de verschillende monsters op petrischalen plaatsen. Als u te veel bacteriekolonies hebt, zijn ze moeilijk te tellen en als er te weinig zijn, is het monster mogelijk niet representatief. Het is over het algemeen een goed idee om de oorspronkelijke oplossing te plateren, vervolgens een 1/10 verdunning (1 deel oplossing, 9 delen zoutoplossing), een 1/100 verdunning en mogelijk een 1/1000 verdunning.
CFU berekenen uit bacteriële verdunning

  1. Voer een voorlopige telling uit

    Voer een voorlopige telling uit van elk gerecht zodra de bacterie broedt, wat meestal een of twee dagen duurt. Tel alleen individuele kolonies, die afzonderlijke, geïsoleerde stippen zouden moeten zijn, niet een hele klodder verschillende kolonies samen gegroeid. Kies de plaat met meer dan 30 van deze kolonies maar minder dan 300.

  2. Tel individuele kolonies

    Tel het aantal individuele kolonies. Dit is het CFU-nummer van uw verdunning - u moet een eenvoudige berekening uitvoeren om de CFU van het oorspronkelijke monster te bepalen. Gebruik voor dit voorbeeld een hypothetische plaat met 46 kolonies.

  3. Bepaal de grootte van de verdunning

    Bepaal de grootte van de verdunning die u hebt gebruikt. (Idealiter hebt u de petrischalen van tevoren geëtiketteerd.) Meng voor dit voorbeeld 1 ml bacteriekweek met 99 ml zoutoplossing. Dit is een 1/100 verdunning.

  4. Verdunningsgraad vermenigvuldigen met verzilverd bedrag

    Vermenigvuldig de verdunningsgraad met de hoeveelheid die u daadwerkelijk hebt verzilverd. Als u 0,1 ml van uw 1/100 verdunning op de agar hebt geplateerd, vermenigvuldigt u 0,1 x 1/100, voor een resultaat van 1/1000 of 0,001.

  5. Verdeel CFU van verdunning

    Deel de CFU van de verdunning (het aantal kolonies dat u hebt geteld) door het resultaat van stap 4. Voor dit voorbeeld berekent u 46 ÷ 1/1000, wat hetzelfde is als 46 x 1.000. Het resultaat is 46.000 CFU in de oorspronkelijke steekproef.