Dit is waarom:

* RNA -neerslag: Ethanol helpt RNA uit oplossing te neerslaan. RNA is erg oplosbaar in water, maar wanneer ethanol wordt toegevoegd, vermindert dit de oplosbaarheid van RNA, waardoor het uit oplossing komt als een vast neerslag.

* Wassen van onzuiverheden: Tijdens de wasstap helpt ethanol verontreinigingen zoals zouten, eiwitten en ander cellulair puin te verwijderen dat mogelijk in het RNA -monster aanwezig is.

Hoe het werkt:

1. Uitdroging: Ethanol is een uitdrogend middel, wat betekent dat het water uit de oplossing verwijdert. Deze vermindering van het watergehalte verlaagt de oplosbaarheid van RNA, wat leidt tot neerslag.

2. zouteffect: In de meeste RNA -extractieprotocollen wordt een zoutoplossing zoals natriumacetaat toegevoegd vóór ethanol. Dit zout helpt om de negatieve lading van het RNA -molecuul te neutraliseren, waardoor het minder oplosbaar is in water en meer kans om neer te slaan.

3. Selectiviteit: Terwijl ethanol RNA neerslaat, doet het DNA niet zo efficiënt neer. Dit helpt ervoor te zorgen dat het uiteindelijke RNA -monster relatief vrij is van DNA -besmetting.

Belangrijke overwegingen:

* Ethanolconcentratie: De concentratie ethanol die wordt gebruikt bij RNA -extractie is cruciaal. Een te laag van een concentratie is mogelijk niet effectief bij het neerslaan van RNA, terwijl een te hoog van een concentratie kan leiden tot de neerslag van andere ongewenste componenten. 75% ethanol wordt vaak gebruikt omdat het een optimaal evenwicht biedt voor neerslag en wassen.

* Temperatuur: Ethanolprecipitatie wordt typisch uitgevoerd bij lage temperaturen, vaak op ijs of bij 4 ° C, om afbraak van RNA te minimaliseren.

Over het algemeen speelt 75% ethanol een cruciale rol in RNA -extractie door RNA uit oplossing te neerslachten en verontreinigingen weg te wassen, waardoor de isolatie van pure en intact RNA wordt gewaarborgd.