Science >> Wetenschap >  >> Biologie

Welke laboratoriumtests worden gebruikt om de aanwezigheid van eiwitten te testen?

Er zijn verschillende laboratoriumtests die worden gebruikt om de aanwezigheid van eiwitten te testen:

1. Biureettest :De Biuret-test is een colorimetrische test die de aanwezigheid van peptidebindingen in een eiwitmonster detecteert. Wanneer een eiwitoplossing wordt gemengd met een alkalische kopersulfaatoplossing, ontstaat er een paarse kleur als er eiwit aanwezig is. De intensiteit van de kleur is evenredig met de eiwitconcentratie.

2. Bradford-test :De Bradford-test is een andere colorimetrische test waarbij gebruik wordt gemaakt van een kleurstof genaamd Coomassie Brilliant Blue G-250 om eiwitten te detecteren. De kleurstof bindt zich aan de eiwitmoleculen en verandert van kleur van bruin naar blauw. De absorptie van de oplossing wordt gemeten bij 595 nm en de eiwitconcentratie kan worden bepaald met behulp van een standaardcurve.

3. Lowry-test :De Lowry-test is een colorimetrische test die de hoeveelheid tyrosine- en tryptofaanresiduen in een eiwitmonster meet. Deze aromatische aminozuren reageren met het Folin-Ciocalteu-reagens en produceren een blauwe kleur. De absorptie van de oplossing wordt gemeten bij 750 nm en de eiwitconcentratie kan worden bepaald met behulp van een standaardcurve.

4. BCA-test :De BCA-test (bicinchoninezuur) is een colorimetrische test die vergelijkbaar is met de Lowry-test, maar gevoeliger en specifieker is voor eiwitten. Het omvat de reactie van eiwit met BCA in een alkalisch milieu om een ​​paarse kleur te produceren. De absorptie van de oplossing wordt gemeten bij 562 nm en de eiwitconcentratie kan worden bepaald met behulp van een standaardcurve.

5. Kjeldahl-methode :De Kjeldahl-methode is een chemisch proces dat het totale stikstofgehalte in een monster bepaalt, op basis waarvan vervolgens het eiwitgehalte wordt geschat. Het omvat het verteren van het monster in geconcentreerd zwavelzuur, het omzetten van de stikstof in ammoniumsulfaat en het vervolgens titreren van de vrijgekomen ammoniak met een standaardzuur.

Deze tests bieden kwantitatieve of semi-kwantitatieve metingen van de eiwitconcentratie in verschillende monsters. De keuze van de test hangt af van factoren zoals de vereiste gevoeligheid, het monstertype en de beschikbaarheid van middelen.