science >> Wetenschap >  >> Natuur

Techniek om afzonderlijke bacteriën in een gemengde cultuur te scheiden

Microbiologen, genetici en moleculair biologen gebruiken bacterieculturen om de geheimen van het leven te ontdekken. Microbiologen bestuderen bacteriën om nieuwe antibiotica te ontdekken voor de behandeling van infecties. Genetici gebruiken bacteriën om te bepalen of chemicaliën mogelijk carcinogene eigenschappen hebben. Moleculair biologen bestuderen de biochemische routes van cellulaire processen om de functies van enzymen die we gemeen hebben met bacteriën te begrijpen. Hoe gevarieerd de studies ook zijn, alle drie de wetenschappen isoleren bacteriële culturen met dezelfde techniek: agarplaat-strepen.

Microbe Basics

Microben zijn eencellige organismen zoals bacteriën en schimmels. Deze organismen reproduceren zich snel en zijn gemakkelijk te kweken, waardoor ze bijzonder nuttig zijn om te bestuderen. Wanneer een potentieel nieuwe microbe in de natuur wordt ontdekt, wordt een monster in een groeimedia geplaatst die een "bouillon" wordt genoemd. Bouillon bestaat uit gesteriliseerd water, zouten, suikers en andere voedingsstoffen die een snelle bacteriegroei in een kolf tijdens de incubatie zullen bevorderen. Echter, vaker wel dan niet, de bouillon bevat meer dan één type bacterie. Om een ​​enkele bacterie te isoleren, zal de wetenschapper een klein monster van de bouillon over een halfvaste agarplaat verspreiden met behulp van een microbiële techniek genaamd "streaking."

Agar-platen

Agar-platen zijn semi-transparant , halfvaste gels bestaande uit zeewier en specifieke concentraties van voedingsstoffen. Het nut van agar ligt in het feit dat het een zacht en zacht oppervlak biedt voor groeiende bacteriën. Wanneer een wetenschapper een enkele bacterie op agar plaatst, zal deze zichzelf vermenigvuldigen door zichzelf duizenden keer te verdubbelen en zal verschijnen als een kleine kolonie van afzonderlijke cellen.

Bacteriën Streaking Tools

Bacteriestrips vereist drie gereedschappen : een agarplaat, een alcoholbrander en een draadlus. De agarplaat is de groeimedia waarmee de bacteriën worden overgebracht na te zijn gegroeid in bouillon. De alcoholbrander is een kleine, met alcohol gevulde lamp voor het steriliseren van de draadlus - een lange, slanke handgreep met een kleine lus van brandwerende draad bevestigd aan een uiteinde. De lus bevat een kleine druppel met bacteriën gevulde bouillon bij het overbrengen van de bacteriën van de bouillon naar de agarplaat.

Bacteriënstripproces -

Strekkende bacteriën op een agarplaat zijn eenvoudig, maar u moet deze stap correct uitvoeren of u isoleert geen afzonderlijke kolonies. Verwarm de lus over de alcoholbrander om de draad te steriliseren en dompel vervolgens de punt van de lus in de bouillon. Trek de lensteunt een aantal keer heen en weer over een kwart van de agarplaat. Steriliseer de lus opnieuw en strijk over en loodrecht op de eerste strepen. Beweeg de lus een paar keer heen en weer over een nieuw gedeelte van de plaat. Steriliseer de tip. strijk één keer lichtjes over het laatste gestreept gedeelte en beweeg de lus enkele keren heen en weer. De streepvorming verdunt de eerste druppel bouillon tot een punt waar de laatste strepen afzonderlijke kolonies zullen bevatten. Plaats de plaat in een incubator of op een tafelblad bij kamertemperatuur en wacht tot de koloniën een nacht lang groeien. Enkele kolonies in de laatste reeks worden geïsoleerde kolonies van een enkele bacterie.