1. Hydrofobe interacties:

* Eiwitten zijn typisch oplosbaar in water vanwege hun hydrofiele (waterminnende) groepen, die waterstofbruggen vormen met watermoleculen.

* Ze bevatten echter ook hydrofobe (waterfense) groepen die de neiging hebben om samen te clusteren.

2. De invloed van ammoniumsulfaat:

* Wanneer ammoniumsulfaat wordt toegevoegd aan een eiwitoplossing, interageert het met de watermoleculen, waardoor ze effectief worden weggelaten van de hydrofiele groepen van het eiwit.

* Deze verstoring van hydratatieschalen rond het eiwit legt de hydrofobe groepen bloot.

3. Aggregatie en neerslag:

* Naarmate de concentratie van ammoniumsulfaat toeneemt, worden de hydrofobe groepen op verschillende eiwitmoleculen meer blootgesteld en interageren met elkaar, wat leidt tot aggregatie.

* Uiteindelijk worden deze aggregaten groot genoeg om onoplosbaar te worden en neer te slaan uit oplossing.

Factoren die de neerslag beïnvloeden:

* eiwitconcentratie: Hogere eiwitconcentraties vereisen hogere ammoniumsulfaatconcentraties voor neerslag.

* Eiwittype: Verschillende eiwitten hebben verschillende mate van hydrofobiciteit, wat leidt tot verschillende gevoeligheden voor ammoniumsulfaatprecipitatie.

* pH: De pH van de oplossing kan de lading van het eiwit en de interactie ervan met ammoniumsulfaat beïnvloeden.

* Temperatuur: Hogere temperaturen verbeteren in het algemeen de oplosbaarheid van eiwitten, waardoor hogere ammoniumsulfaatconcentraties voor neerslag vereisen.

Toepassingen van ammoniumsulfaatprecipitatie:

* Eiwitzuivering: Het is een veel voorkomende techniek voor het concentreren en gedeeltelijk zuiveren van eiwitten uit complexe mengsels.

* kristallisatie: Ammoniumsulfaat kan worden gebruikt om eiwitkristallisatie te bevorderen, wat cruciaal is voor structurele studies.

Voordelen van het gebruik van ammoniumsulfaat:

* Relatief goedkoop en direct beschikbaar.

* Over het algemeen niet-ontkenning van eiwitten, wat betekent dat het hun natieve structuur niet vernietigt.

* Maakt selectieve neerslag mogelijk op basis van eiwiteigenschappen.

Overwegingen:

* Het is cruciaal om de ammoniumsulfaatconcentratie voor elk specifiek eiwit en de gewenste uitkomst te optimaliseren.

* Het neerslag kan andere moleculen bevatten naast het doel -eiwit, waardoor verdere zuiveringsstappen nodig zijn.

* Sommige eiwitten kunnen gevoelig zijn voor hoge zoutconcentraties.

Conclusie is ammoniumsulfaatprecipitatie een waardevolle techniek voor het scheiden en zuiveren van eiwitten door de verschillen in hun hydrofobe interacties en oplosbaarheid in aanwezigheid van hoge zoutconcentraties te benutten. .