Om *V* ml van een fosfaatbuffer met *C"M NaH2PO4 en *D*M Na2HPO4 te bereiden die een pH van 5,8 oplevert, hebt u het volgende nodig:

$$ [H^+] =10^{−5,8} =1,58 × 10^{−6} M$$

Waarbij [H+] de gewenste waterstofionenconcentratie is.

We kunnen de Henderson-Hasselbalch-vergelijking gebruiken om de verhouding NaH2PO4 tot Na2HPO4 te berekenen die nodig is om deze pH te bereiken:

$$pH =pKa + log \left ( \frac{[A^-]}{[HA]} \right )$$

Waar:

* *Ka* is de zuurdissociatieconstante van H2PO4- (het geconjugeerde zuur van NaH2PO4)

* [A-] is de concentratie van Na2HPO4 (de geconjugeerde base van NaH2PO4)

* [HA] is de concentratie NaH2PO4 (de zuurvorm)

De *Ka* van H2PO4- bij 25°C is *2,2 *10-7*. Als we daarom de gegeven waarden in de Henderson-Hasselbalch-vergelijking vervangen, krijgen we:

$$5,8 =7,2 + log \left ( \frac{[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} \right )$$

Als we [Na2HPO4] / [NaH2PO4] oplossen, krijgen we:

$$\frac {[Na2HPO4]}{[NaH2PO4]} =0,398$$

Daarom moet de verhouding [NaH2PO4] tot [Na2HPO4] 1:0,398 zijn om een ​​pH van 5,8 te bereiken.

Stap 2:Bereid de NaH2PO4- en Na2HPO4-oplossingen voor

- Weeg de benodigde hoeveelheid NaH2PO4 (0,2 M) en Na2HPO4 (0,1 M) af met behulp van een analytische balans.

- Los elke verbinding op in Milli-Q water in aparte containers.

- Vul het volume van elke oplossing aan tot 500 ml met Milli-Q water.

*Stap 3:Meng de NaH2PO4- en Na2HPO4-oplossingen

- Meng de twee oplossingen in de juiste verhouding (in dit geval 1 volume van de 0,2 M NaH2PO4-oplossing met 0,398 volume van de 0,1 M Na2HPO4-oplossing).

- Voeg DI-water toe om het totale volume op 1 liter te brengen.

- Controleer de pH van de buffer met behulp van een pH-meter. Pas indien nodig de pH aan door kleine hoeveelheden van de 0,2 M NaH2PO4- of de 0,1 M Na2HPO4-oplossing toe te voegen.