science >> Wetenschap >  >> Chemie

Hoe wordt een monster voorbereid voor het bekijken onder een microscoop?

Een vroeger onzichtbaar gebied werd onthuld in het begin van de 17e eeuw met de constructie van de eerste samengestelde microscopen die tot grote herzieningen in wetenschappelijk inzicht leidden. Basis samengestelde microscopen zijn nu standaard uitrusting in de geneeskunde en natuurwetenschappen. Het doorgelaten zichtbare licht schijnt door dunne preparaten voor vergroting. Transmissie en scanning elektronenmicroscopen ontwikkeld vanaf 1931. Ze gebruiken geen optisch licht, maar bundels van elektronen en magnetische velden om exemplaren te bekijken. Voornamelijk voor institutioneel onderzoek, vereist de voorbereiding van het preparaat complexe, dure apparatuur.

Compound-microscopen begrijpen

Er bestaan ​​verschillende gespecialiseerde typen samengestelde microscopen, maar heldere veldmicroscopen zijn het meest gebruikelijk. Monsters voor hen zouden slechts enkele microns moeten zijn, wat een miljoenste van een meter is, dik. Dikkere exemplaren laten niet genoeg licht door en maken een precieze scherpstelling niet mogelijk. Heldere veldmicroscopen hebben een buis met objectieve lenzen aan de onderkant, het dichtst bij het monster en een oculaire lens of oculair aan de bovenkant. Verschillende objectieflenzen van verschillende vergrotingen draaien op een neusstuk of een torentje. Het podium net onder het neusstuk houdt de objectglaasje vast en daaronder schijnt een lichtbron door een condensor naar het preparaat. Moderne samengestelde microscopen kunnen een object vergroten van 1.000 tot 2.000 keer de oorspronkelijke afmetingen.

Hele mounts

Voor kleine voorwerpen zoals haren, kleine insecten, insectendelen of pollenkorrels, wordt het monster geplaatst direct op het midden van een glazen of plastic microscoopglaasje met een kleine hoeveelheid bevestigingsmedium, meestal een synthetisch of natuurlijk harsproduct voor permanente glijbanen. Voor tijdelijke dia's, zoals een druppel vijverwater dat micro-organismen bevat, is het water het monstermedium. Bescherm monsters met een dekglaasje, een rond of vierkant heel dun stuk glas of plastic. Sommige monsters moeten worden gekleurd met natuurlijke of synthetische kleurstoffen die bedoeld zijn voor microscopie om goed te worden gezien.

Squashen en vegen

Een eenvoudige manier om een ​​dun monster te bereiden, is door een klein stukje weefsel te pletten of af te vlakken. onder de dekmantel. Vaak gebruikt in plantmonsters om chromosomen te zien, snelgroeiende weefsels zoals worteluiteinden of helmknoppen die celdeling ondergaan worden bewaard in fixatief, dan verzacht en gekleurd om de chromosomen te onthullen. Zachte druk van het gumuiteinde van een potlood gecentreerd over het monster dat bedekt is met het deksel, dwingt de cellen uit elkaar in een enkele laag. In uitstrijkjes wordt het monster dun verspreid over één schuif met behulp van een andere schuif als de spreider, en de resulterende uitstrijk wordt gedroogd en gekleurd. In de geneeskunde worden monsters van lichaamsvloeistoffen, zoals bloed, cerebrospinale vloeistof of sperma ingesmeerd.

Stained Tissue Sections

Een meer gecompliceerde sectiesprocedure vindt plaats wanneer de structuur en organisatie van een geheel klein organisme of een stuk weefsel moet worden onderzocht. Voor de meeste monsters wordt eerst het weefsel bewaard en gehard en het water verwijderd. Vervolgens wordt het monster ingebed in een stijf medium zoals was of plastic en gesneden in zeer dunne secties van slechts enkele microns dik met behulp van een precisiemachine die een microtoom wordt genoemd. Het monster is georiënteerd om doorsneden of longitudinale secties te geven wanneer het wordt gesneden. De secties worden gehecht op microscoopglaasjes, het inbeddingsmedium wordt verwijderd en de weefsels worden gekleurd om structuren en cellen van elkaar te onderscheiden. Waar snelheid essentieel is, zoals in chirurgische biopsieën voor kanker, worden monsters bevroren, in plakjes gesneden met een bevriezend microtoom, gekleurd en onderzocht.