science >> Wetenschap >  >> Chemie

Nieuwe SERS-strategie ontwikkeld voor bepaling van bèta-galactosidase-activiteit

In-situ SERS-uitleesstrategie voor individuele cellen. (A) Het schema van de strategie om de betrouwbaarheid te verbeteren door de kleurtijden te verkorten. (B) X-gal kleuringstest voor cellen. (C en D) In-situ SERS-uitlezing. De rode en zwarte driehoeken markeren respectievelijk de positieve en negatieve cellen. De blauwe band geeft de markerpiek van X-gal-hydrolysaten aan. Krediet:LI Shaofei

Onlangs, een onderzoeksgroep onder leiding van prof. Yang Liangbao van de Hefei Institutes of Physical Science (HFIPS) van de Chinese Academy of Sciences (CAS) ontwikkelde in-situ Surface-enhanced Raman-spectroscopie (SERS) uitleesstrategie om de betrouwbaarheid van bèta-galactosidase te verbeteren activiteitstest op basis van X-gal-kleuring. Relevante onderzoeksresultaten zijn gepubliceerd in Talanta.

Bèta-galactosidase (β-gal) activiteit is gesloten in verband met verouderingscellen en met veroudering geassocieerde ziekten. X-gal (5-broom-4-chloor-3-indolyl-β-D-galactoside) kleuring is de meest gebruikte en commercieel beschikbare colorimetrische test met goedkope en niet-intensieve apparatuur.

Echter, traditionele uitlezing van β-gal-activiteit op basis van X-gal-kleuring is beperkt tot lage gevoeligheid bij korte incubatietijden en valse positieven bij lange incubatietijden. Het is moeilijk om consistente positieven te bereiken in celproliferatie omdat de groeitoestand van de cel vaak niet homogeen is.

In dit onderzoek, de onderzoekers onthulden de mogelijke rol van onoplosbare X-gal-hydrolysaten bij het veroorzaken van valse positieven. X-gal hydrolysaten, het veroorzaken van diffuse diffusievervuiling afhankelijk van het organische medium, kan de uitleesstrategie sturen als universele ontwijkingsfactor.

Bijgevolg, ze stelden de gevoelige en snelle in-situ SERS-uitleesstrategie voor om β-gal-positieve cellen te identificeren en te lokaliseren op basis van X-gal-kleuring.

Deze nieuwe strategie bleek verder nodig en haalbaar te zijn. Het loste de uitdagingen van traditionele uitlezing op, en dat zal van grote betekenis zijn in verschillende toepassingen zoals leeftijdsgerelateerd onderzoek en anti-verouderingstherapie.