Microbiële basisprincipes

Microben, waaronder bacteriën en schimmels, zijn eencellige organismen die zich snel voortplanten, waardoor ze ideaal zijn voor laboratoriumonderzoek. Wanneer een nieuwe microbe uit de natuur wordt geïsoleerd, wordt deze eerst gekweekt in een vloeibaar medium dat bekend staat als bouillon, dat gesteriliseerd water, zouten, suikers en andere voedingsstoffen bevat die een snelle bacteriegroei in een kolf ondersteunen.

Agarplaten:het solide groeimedium

Agar, een gelatineuze substantie afgeleid van zeewier, wordt gemengd met voedingsstoffen om een halfvaste gel te vormen. Dit medium zorgt voor een glad, inert oppervlak waardoor een enkele bacterie zich kan vermenigvuldigen tot een zichtbare kolonie.

Essentiële hulpmiddelen voor strepen

Er zijn drie items nodig:een agarplaat, een kleine alcohollamp (om te steriliseren) en een steriele draadlus. De lus draagt een kleine hoeveelheid bouillon terwijl deze op het bord wordt overgebracht.

Stap-voor-stap Streaking-protocol

1. Verwarm de lus in de alcoholvlam totdat deze roodgloeiend wordt; hierdoor wordt de tip gesteriliseerd.
2. Doop de lus in de bouillon, zodat er een klein druppeltje aan de punt blijft hangen.
3. Streef de lus heen en weer over een kwart van de plaat en teken een ononderbroken lijn.
4. Steriliseer de lus opnieuw en herhaal de strepen loodrecht op de eerste lijn, zodat je nog een kwart bestrijkt.
5. Ga door met strepen over nieuwe secties, waarbij u telkens de lus steriliseert om de bacteriesuspensie geleidelijk te verdunnen.
6. Het laatste, licht gestreepte gebied moet geïsoleerde kolonies bevatten, elk afgeleid van een enkele cel.

Plaats de plaat in een incubator (of op kamertemperatuur) en laat de kolonies zich 12 tot 24 uur ontwikkelen.

Waarom dit belangrijk is

Nauwkeurige isolatie is van cruciaal belang voor vervolgtoepassingen; antibioticascreening, mutageniciteitstesten en biochemische trajectstudies zijn allemaal afhankelijk van zuivere culturen. Beheersing van agarstrepen zorgt voor reproduceerbare, betrouwbare resultaten.