Wetenschap
Hier is hoe het werkt:
1. Preparaat van het bloedmonster: Het bloedmonster wordt meestal behandeld met een lysisbuffer om de cellen open te breken en hun inhoud vrij te geven, inclusief DNA.
2. Centrifugatie: Het gelyseerde monster wordt vervolgens gecentrifugeerd bij hoge snelheden, waardoor een dichtheidsgradiënt ontstaat.
3. Sucrose gradiënt: Een sucrose -oplossing is gelaagd bovenop het gelyseerde monster. Deze oplossing heeft een gradiënt van toenemende sucroseconcentratie, waardoor een gradiënt van toenemende dichtheid ontstaat.
4. Scheiding: Tijdens centrifugatie zullen verschillende cellulaire componenten migreren naar posities in de gradiënt waar hun dichtheid overeenkomt met de omliggende sucroseconcentratie. DNA, relatief dicht, zal zich vestigen op een specifieke laag binnen de gradiënt.
5. Collectie: De laag met het DNA wordt vervolgens verzameld en verder gezuiverd om resterende verontreinigingen te verwijderen.
Daarom is sucrose niet direct betrokken bij de afbraak van cellen of de isolatie van DNA zelf. In plaats daarvan fungeert het als een dichtheidsgradiëntmedium om de scheiding van DNA van andere cellulaire componenten te vergemakkelijken.
Belangrijke opmerking: Hoewel sucrose wordt gebruikt in sommige DNA -isolatieprotocollen, kunnen andere methoden gebruik maken van verschillende dichtheidsgradiëntmedia zoals cesiumchloride (CSCL).
Wetenschap © https://nl.scienceaq.com