Wetenschap
Schematische voorstelling van de subdiffractie-gelimiteerde beeldvorming van een vlindermonster met behulp van in situ geprinte glycerol superlenzen. De Morpho menelaus menelaus (M. m. menelaus) en Agrias beatifica beata (A. b. beata) monsters werden plat op een schoon glasplaatje geplaatst om af te drukken. De microscopische afbeeldingen tonen de schaalverdeling van de ventrale vleugel van M. m. menelaus (linksonder) en de superlens-array gedrukt op de vleugelschalen (midden). De superlenzen vertoonden een bolvormige geometrie op de vleugelschubben. De laterale opname (rechtsboven) is gemaakt met de omgekeerde microscoop (Nikon, Binden). De dimensiestatistieken bevatten gegevens van 13 gemeten lenzen op basis van hun laterale afbeeldingen. Krediet:microsystemen en nano-engineering, doi:https://doi.org/10.1038/s41378-018-0040-3
Nanostructuren en natuurlijke patronen hebben onderzoekers in bio-geïnspireerde materiaaltechnologie al lang gefascineerd. Biologische monsters kunnen op nanoschaal worden afgebeeld en geobserveerd met behulp van geavanceerde analytische hulpmiddelen in de materiaalkunde, waaronder scanning-elektronenmicroscopie (SEM) en transmissie-elektronenmicroscopie (TEM). Hoewel beeldvormingsmethoden bijdragen aan het begrip van structuren door materiaaleigenschappen voor de synthese van biomimetische materialen te onthullen, ze hebben dit vaak gedaan met het verlies van fotonische eigenschappen die inherent zijn aan de materialen.
Bij een nieuwe methode materiaalwetenschappers Boliang Jia en collega's van de afdelingen werktuigbouwkunde en robotica presenteerden een afdrukbare biocompatibele superlens die direct op interessante objecten werd geplaatst om subdiffractie-beperkte kenmerken te observeren (resolutie voorbij de diffractielimiet). Vervolgens bekeken ze de natuurlijke kenmerken met behulp van een optische microscoop om beeldvorming op nanoschaal van vlindervleugels in kleur te demonstreren. De studie maakte superresolutiebeeldvorming en een groter gezichtsveld (FOV) mogelijk in vergelijking met de eerdere op diëlektrische microbolletjes gebaseerde optische systemen van superresolutiemicroscopie.
De nieuwe aanpak creëerde een snel en flexibel pad om de directe kleuren van biologische kenmerken op nanoschaal in het zichtbare bereik te observeren. De resultaten zijn nu gepubliceerd in Microsystemen en nano-engineering , waar het werk optische metingen mogelijk maakte op de subdiffractie-beperkte schaal. Een superlens is gebaseerd op een optisch materiaal met een negatieve brekingsindex (optische metamaterialen) dat bijna alle bekende optische verschijnselen experimenteel zou kunnen omkeren. Technisch gezien, een dunne film met negatieve index kan fungeren als een 'superlens' om beelddetails te verschaffen met een resolutie die de diffractielimiet overschrijdt waaraan alle lenzen met een positieve index worden onderworpen.
In situ printen van glycerol superlenzen voor beeldvorming op nanoschaal van vlindervleugels. a) Illustratie van het drukproces en een microscopisch beeld van de gevormde superlens-array op de vleugelschubben. b) Conceptueel beeld van de directe observatie op nanoschaal van vlindervleugelschubben via superlenzen, en het vergrote beeld verkregen door de superlens die een resolutie aangeeft van kenmerken met afmetingen kleiner dan 1 m op de vleugelschaal. Krediet:microsystemen en nano-engineering, doi:https://doi.org/10.1038/s41378-018-0040-3
In de studie, Jia et al. bedacht een methode om glycerol (transparante vloeistof) op vlindervleugels te printen en vleugelstructuren op nanoschaal te observeren die tot nu toe onopgemerkt waren met conventionele optische microscopen. Het werk zal de weg vrijmaken voor geavanceerde vloeibare superlenzen in combinatie met snelle en flexibele methoden in de optica. De resultaten zullen helpen bij nanostructurele inspectie via biofotonica in biologische en niet-biologische monsters.
De vlindervleugels van Morpho cypris werden voor het eerst waargenomen via SEM met hoge resolutie in 1942, wat leidde tot de ontdekking van gedetailleerde structuren onder de diffractielimiet met behulp van geavanceerde tools. Vanaf dat moment, Morpho-vlinders zijn een onderwerp van interesse geweest in onderzoek naar bio-geïnspireerde materialen vanwege hun iriserende kleur en duidelijke fotonische eigenschappen. Al decenia, de eigenschappen van lichtinterferentie als gevolg van hun briljante nanostructuren hebben grote belangstelling gewekt in onderzoek naar nanofotonica en biomimetische materialen. Echter, directe optische waarnemingen van de subdiffractie-beperkte structuur van de vleugels op nanoschaal moeten nog worden gerapporteerd.
(1) Karakterisering van bedrukte glycerol superlenzen met verschillende aantallen druppels/lens. a–e) Laterale afbeeldingen van glycerollenzen met 1, 5, 10, 30, en 60 druppels/lens op een schone siliconenwafel. f) De jetting-golfvorm die in het experiment werd gebruikt. g) Percelen van lenshoogte (blauw kruis), diameter (oranje ster), en H/D-verhouding (zwarte cirkel) met betrekking tot het aantal druppels/lens. h) Een op de chip geprinte glycerol superlens-array (50 vol%, 50 druppels/lens) waargenomen via een 4× (NA 0,10) objectief in een beeldhoek van 45° met een Nikon, Ti-E microscoop (links). De tabel (rechts) toont de dimensiestatistieken. Schaalbalk:a–e 20 m, h 100 µm. (2) Configuraties van de experimentele opstelling a) Schematische voorstelling van het beeldvormingssysteem op basis van het Nikon Ni-E-platform zonder het gebruik van een superlens. De belangrijkste componenten zijn een Andor Zlya 5.5 sCOMS-camera met een gemotoriseerde scherpsteltrap (Z), een Intensilight kwikvezelverlichting (C-LHGFIE), een filterkubus, een doel, en een gemotoriseerde monstertafel (XY). b) De configuratie met een BTG-microbolletje (boven) en de optische beelden van twee BTG-microbolletjes, BTG-A (midden) en BTG-B (onder), gemonteerd op een microsonde (5 m tip diameter) met NOA63 (Norland) lijm. c) De configuratie met een geprinte glycerol superlens (boven) en de optische afbeeldingen van twee lenzen geprint op locatie-I (midden) en locatie-II (onder) van de CPU-monsters. Krediet:microsystemen en nano-engineering, doi:https://doi.org/10.1038/s41378-018-0040-3
Microsferen met een hoge brekingsindex in waterige media hebben de afgelopen jaren veel belangstelling gewekt voor het in vivo observeren van in vloeistof ondergedompelde biologische monsters zoals biologische cellen. Nog, de methode is niet gunstig voor monsters met een hoge brekingsindex in droge omstandigheden. In het huidige werk, Jia et al. presenteerde een in situ gedrukte biocompatibele glycerol superlens (SL) met een hogere resolutie en grotere FOV dan bariumtitanaatglas (BTG) microsferen onder droge omstandigheden. De wetenschappers kozen voor glycerol omdat het een transparante vloeistof is met een relatief hoge brekingsindex die in staat is tot afdrukbare druppelvorming over een breed groottebereik.
Als een belangrijk kenmerk, glycerol bevat sterke intermoleculaire interacties en is daarom zeer goed bestand tegen verdamping. Hoewel microdruppeltjes water meestal vrijwel onmiddellijk verdampen, ter vergelijking, glycerol gedrukt als druppeltjes met een volume van 50 procent zou minstens een dag op substraten kunnen bestaan zonder significante veranderingen in de grootte. Jia et al. daarom direct geprinte glycerol superlenzen op een Morpho vlindervleugel met behulp van een inkjetdrukmachine. Daarna, ze karakteriseerden de glycerolbeelden met behulp van een centrale verwerkingseenheid (CPU)-geïntegreerd circuit (IC). De wetenschappers observeerden nanobiostructuren variërend van 50 nm tot 200 nm in schaal. In productie, de wetenschappers pasten de viscositeit van de glyceroloplossing aan via verdunningstests met MiliQ-water om een optimale concentratie van 50 volumeprocent (50 vol%) voor het printen te selecteren.
Experimenteel verkregen afbeeldingen op locatie-I op het CPU-monster. a–d) Optische beelden gemaakt via BTG-A (a), BTG-B (b), Gly-I (c), en zonder superlens (d). Het gebruikte objectief was 100× (NA 0,90). De geschatte gezichtsvelden (FOV's) in een, B, en c zijn 4,7, 2.9, en 7,5 m in diameter, respectievelijk. e) Het SEM-beeld over hetzelfde gebied. f–j) Vergrote afbeeldingen over een gebied van ongeveer 3,9 μm × 2,7 μm vanaf het midden van a–e, respectievelijk. De gele pijlen wijzen naar een "H"-achtig patroon van ongeveer 120 nm breed. k–o) Bandpass-gefilterde beelden van f–j, respectievelijk. De schaalbalk in f–o:500 nm. p) Profielen van de rode lijnen in k–o met genormaliseerde intensiteit. De lijnprofielen van 1700 nm zijn uitgelijnd met de kenmerken in de SEM-afbeelding hierboven. Krediet:microsystemen en nano-engineering, doi:https://doi.org/10.1038/s41378-018-0040-3
op het gebied van optica, vaste immersielenzen (SIL's) kunnen de optische resolutie verbeteren door de effectieve numerieke apertuur (NA) van het beeldmedium te vergroten. De druppellens wordt beschouwd als een vloeibare versie van SIL's met een onberispelijk oppervlak. De wetenschappers karakteriseerden eerst de bedrukte glycerol-superlenzen in het onderzoek met behulp van een ander aantal druppels per lens op een schone siliciumwafel voordat ze op vlindervleugels werden toegediend. Ze selecteerden na enkele proeven het ideale aantal druppels per lens; de resulterende diameters van de glycerollenzen waren vergelijkbaar met BTG-microsferen. Daarna, ze vergeleken configuraties van de experimentele opstelling voor de BTG-microsferen en de glycerol-superlens. Het werk toonde aan dat grote BTG-microsferen een groot gezichtsveld, terwijl een hogere resolutie werd verkregen met kleinere BTG-microsferen.
Toen de wetenschappers de beelden vergeleken die werden verkregen met superlenzen van glycerol en die verkregen met BTG, de resultaten aanzienlijk verbeterd in uniformiteit voor afbeeldingen verkregen met behulp van glycerol superlenzen, naast scherpere kenmerken op nanoschaal. Dit impliceerde dat bedrukte superlenzen van glycerol een superieure resolutiecapaciteit boden in vergelijking met BTG-microsferen van gelijke en kleinere afmetingen in lucht.
(1) Vergelijking van afbeeldingen van de M. m. menelaus ventrale vleugelschubben. De kleurenafbeeldingen a en f zijn vanuit het oculair gemaakt met een iPhone 7 Plus-camera. Grijswaardenafbeeldingen b–d en g–i zijn gemaakt met een Andor Zyla5.5 sCMOS-camera. Afbeeldingen e en j zijn gemaakt door SEM; a–e zijn afbeeldingen van grondschalen; f-j zijn afbeeldingen van dekkingsschalen; en c en h zijn de vergrote afbeeldingen van de rode vierkantjes in b en g, respectievelijk. Gele haakjes geven een van de lamellenpunten op de richels aan. Alle optische beelden werden genomen onder een 100× (NA 0.90) objectief. (2) Analyse met kleurenafbeeldingen van sub-diffractie-beperkte structuren. Grondschubben van M. m. menelaos. a-d) werden uit het oculair genomen met een iPhone 7 Plus-camera zonder en via de glycerol-superlens. Lijnprofielen over de rode stippellijnen in a-e worden weergegeven in f en g. De door gele pijlen gemarkeerde richels zijn vergroot en worden rechtsonder weergegeven. De omgekeerde gele rechthoeken markeren de geïdentificeerde lamelpunten langs elk vergroot gedeelte van de richels. Voor richels Ra en Rc afgebeeld zonder de superlens, er waren geen lamelpunten te onderscheiden. De labels “La–e” komen overeen met lijnprofielen, en labels "Ra-e" komen overeen met de vergrote ribbels. Schaalbalk:2 μm. OM optische microscopie, SL superlens, SEM scanning elektronenmicroscopie. Krediet:microsystemen en nano-engineering, doi:https://doi.org/10.1038/s41378-018-0040-3
In hun werk, Jia et al. waargenomen twee soorten vlinders:Morpho Menelaus en Agrias beatifica beata. De wetenschappers drukten 60 glyceroldruppels (of lenzen) op de vlindermonsters om sferische lenzen te verkrijgen met een diameter van ongeveer 95 µm. Ze observeerden de kenmerken van de vleugelschaal via een rechtopstaand microscoopsysteem. De wetenschappers waren in staat om de ventrale vleugelschubben van de vlinders te vangen, waar de Morpho-soort twee soorten vleugelschubben vertoonde; grond- en dekschalen.
In vergelijking met SEM, glycerol superlenzen waren niet in staat om volledige structuren volledig op te lossen, maar ze toonden het bestaan aan van substructuren tussen de ruggen van vlindervleugels. Bijvoorbeeld, Jia et al. toonde aan dat in situ glycerol superlenzen de limiet voor nanoschaalstructuren in biologische monsters kunnen verlengen tot een breedte van ongeveer 200 nm. Aanvullende experimenten toonden het vermogen aan om subdiffractie-gelimiteerde nanobiostructuren in kleur af te beelden met behulp van de superlenzen.
De nieuwe methode biedt een kosteneffectieve, snelle en hoge resolutie beeldvormingstechniek om subdiffractie-gelimiteerde nanobiostructuren in situ te visualiseren. Het werk maakt de weg vrij voor met water niet mengbare vloeistoffen met hoge brekingsindices om vloeibare superlenzen te printen voor op water gebaseerde beeldvormingstoepassingen. Biocompatibele vloeistoffen zoals siliconenolie kunnen vervolgens worden onderzocht als superlenzen onder water via goedkope inkjetprinten. Materiaalwetenschappers blijven werken aan de ontwikkeling van geavanceerde vloeibare superlenzen in nanobiofotonica. Het schema geïntroduceerd door Jia et al. biedt een snelle en eenvoudig te implementeren strategie om nanobiostructuren in biologische en niet-biologische monsters te observeren.
© 2019 Wetenschap X Netwerk
Wetenschap © https://nl.scienceaq.com