Door bijdrager
Bijgewerkt op 30 augustus 2022

Het beheersen van de kunst van het verdunnen is essentieel voor iedereen die in de chemie of microbiologie werkt. Nauwkeurige verdunningen verbeteren de laboratoriumprecisie, verminderen de variabiliteit en leiden uiteindelijk tot betrouwbaardere gegevens. De volgende stapsgewijze handleiding is gebaseerd op de beste laboratoriumpraktijken en veiligheidsnormen, zodat u elke verdunning met vertrouwen en nauwkeurigheid kunt uitvoeren.

Stap 1 – Selecteer het juiste glaswerk

Gebruik voor chemische of analytische verdunningen volumetrisch glaswerk, zoals een maatpipet en een maatkolf. In de microbiologie zijn serologische pipetten en maatcilinders geschikt voor het overbrengen van kleine volumes terwijl de oplossing telbaar blijft.

Stap 2 – Begin met een goed gedefinieerd aandeel

Begin met een vloeibare stamoplossing:een puur vloeibaar monster of een oplossing bereid uit een poeder of vloeistof die is verdund tot een bekende concentratie.

Stap 3 – Voer een chemieverdunning uit

Meet het exacte volume van de voorraad af met een maatpipet en breng het over in een maatkolf met het gewenste eindvolume. Voor een verdunning van 1:100 pipetteert u 1,0 ml bouillon in een kolf van 100 ml en voegt u 99 ml verdunningsmiddel toe om een totaal van 100 ml te bereiken.

Stap 4 – Voer een microbiologische verdunning uit

Breng de stockoplossing met een serologische pipet over in een bekerglas en voeg vervolgens het verdunningsmiddel toe met behulp van een maatcilinder. Voor een verdunning van 1:100 voegt u 1 ml bouillon toe aan 100 ml verdunningsmiddel, waardoor een eindvolume van 101 ml ontstaat.

Stap 5 – Kies het juiste verdunningsmiddel

Gebruik het verdunningsmiddel dat voor uw methode is gespecificeerd. In de microbiologie omvatten veel voorkomende keuzes media, buffers en steriel water. In de chemie kunnen verdunningsmiddelen oplosmiddelen, zuren, basen of gedeïoniseerd water zijn, afhankelijk van de analyt.

Stap 6 – Grondig mengen tijdens het overbrengen

Draai de kolf halverwege de toevoeging van het verdunningsmiddel rond om de homogeniteit te garanderen, en blijf vervolgens toevoegen tot het eindvolume is bereikt.

Stap 7 – Voeg het definitieve volume druppelsgewijs toe

Gebruik voor de laatste paar milliliter een druppelaar om verdunningsmiddel in enkele druppels toe te voegen, zodat het uiteindelijke volume nauwkeurig wordt gemeten.

Stap 8 – Lees de meniscus correct af

Houd de kolf of beker op ooghoogte en lees de onderkant van de meniscus af:de concave curve gevormd door het vloeistofoppervlak. Lijn dit punt uit met de schaalverdeling op de container voor een nauwkeurige meting.

Stap 9 – Laatste homogenisatie

Steek een magnetische roerstaaf in de verdunning en plaats de container op een roerplaat. Als er geen roerplaat beschikbaar is, stop dan de kolf, draai hem rond en draai hem herhaaldelijk ondersteboven om te mengen.

Stap 10 – Voer seriële verdunningen uit

Wanneer een groot eindvolume nodig is, voer dan seriële verdunningen uit. Voor een verdunning van 1:10.000 moet u eerst een verdunning van 1:100 maken (1 ml voorraad in 100 ml verdunningsmiddel). Breng vervolgens 1 ml van deze tussenoplossing over in nog eens 100 ml verdunningsmiddel. Het cumulatieve effect levert een verdunning van 1:10.000 op.

Stap 11 – Ga voorzichtig om met zure verdunningen

Voeg altijd zuur toe aan water, en niet andersom, om exotherme reacties te voorkomen. Begin met het toevoegen van een klein volume water aan de kolf voordat u het zuur toevoegt, en verdun vervolgens tot het gewenste volume.

Dingen die nodig zijn

• Volumetrische pipet en flesje met stop
• Serologische pipet
• Gegradueerde cilinder
• Beker
• Pipetbol
• Druppelaar
• Magnetische roerstaaf en plaat

TL;DR (te lang; niet gelezen)

Etiketteer verdunningen duidelijk, vermijd het vervangen van vloeistof die verloren gaat tijdens het mengen en voeg altijd zuur toe aan het water om de veiligheid en nauwkeurigheid te garanderen.

Waarschuwing

Het toevoegen van water aan zuur kan heftige reacties en ernstig letsel veroorzaken. Gebruik een pipetbol, ​​pipet nooit met de mond en voeg altijd zuur toe aan water.