Het experiment

1. Materialen:

* enzym: Je hebt een enzym nodig dat gemakkelijk is om mee te werken. Een populaire keuze is catalase , die in veel levende wezens wordt gevonden (zoals aardappelen of lever). Het breekt waterstofperoxide (H₂o₂) af in water en zuurstof.

* waterstofperoxide: Het substraat voor catalase.

* buffers: Oplossingen die weerstand bieden aan veranderingen in pH. U hebt een reeks buffers nodig om verschillende pH -niveaus te creëren. Veel voorkomende keuzes zijn:

* fosfaatbuffer: Voor pH-bereik 6-8

* Citraatbuffer: Voor pH-bereik 3-6

* Tris -buffer: Voor pH-bereik 7-9

* Testbuizen: Voor het vasthouden van de reactiemengsels.

* Afgestudeerde cilinders: Om vloeistoffen nauwkeurig te meten.

* thermometer: Om ervoor te zorgen dat alle reacties op dezelfde temperatuur optreden.

* Meetapparaat: Dit kan een:

* Afgestudeerde cilinder om het volume van zuurstofgas geproduceerd te meten.

* spectrofotometer om de afname van waterstofperoxideconcentratie in de loop van de tijd te meten (geavanceerder).

2. Procedure:

1. Bereid uw buffers voor: Maak een reeks buffers met verschillende pH -niveaus (bijv. PH 4, 5, 6, 7, 8).

2. Stel uw reactiemengsels in: Combineer in afzonderlijke testbuizen het volgende:

* Een specifiek volume van uw gekozen bufferoplossing.

* Een vast volume van de enzymoplossing (catalase).

* Een vast volume van waterstofperoxide -oplossing.

3. Controle: Creëer een controle -reactie met dezelfde ingrediënten maar met behulp van gedestilleerd water in plaats van een buffer. Dit zal helpen bepalen of de buffer zelf de reactie beïnvloedt.

4. Incubate: Plaats alle testbuizen in een waterbad of incubator om een constante temperatuur te behouden (ongeveer 25 ° C).

5. Observeer: Noteer de snelheid van de reactie. Dit kan worden gedaan door:

* het meten van de hoeveelheid geproduceerde zuurstofgas: Let op de vorming van bubbels in de testbuis en gebruik een afgestudeerde cilinder om het volume gas te meten dat gedurende een vaste periode wordt geproduceerd.

* Het meten van de afname van waterstofperoxideconcentratie: Gebruik een spectrofotometer om de absorptie van waterstofperoxide bij specifieke golflengten te meten.

6. Herhaal: Herhaal het experiment met hetzelfde enzym- en substraatconcentraties, maar gebruik verschillende pH -buffers om te zien hoe de reactiesnelheid verandert.

3. Verwachte resultaten:

* Optimale pH: U moet merken dat het enzym een optimale pH heeft waarmee het het beste functioneert. Dit is de pH waarbij de actieve plaats van het enzym de juiste vorm heeft om efficiënt aan het substraat te binden.

* Verminderde activiteit: Bij pH -niveaus boven of onder het optimum zal de activiteit van het enzym afnemen. Dit komt omdat de pH de vorm van de actieve plaats kan beïnvloeden, waardoor deze minder effectief is bij het binden aan het substraat.

Key Concepts:

* enzymen zijn eiwitten: Ze hebben een specifieke driedimensionale vorm die cruciaal is voor hun functie.

* Actieve site: Het deel van het enzym dat bindt aan het substraat.

* Optimale pH: De pH waarop een enzym het beste werkt.

* denaturatie: Extreme pH -niveaus kunnen ervoor zorgen dat enzymen hun vorm verliezen en inactief worden.

Gegevensanalyse

* Grafiek uw resultaten, het uitzetten van de pH-waarden op de x-as en de reactiesnelheid (bijv. Volume van zuurstofgas geproduceerd of afname in waterstofperoxideconcentratie) op de y-as.

* Je zou een klokvormige curve moeten zien, waarbij de piek de optimale pH voor het enzym weergeeft.

Laat het me weten als je meer specifieke vragen hebt of andere experimenten wilt verkennen!