Wetenschap
1. Celfractionering:
* Dit is een klassieke techniek waarbij homogenisatie is (open breek) cellen, gevolgd door differentiële centrifugatie .
* Homogenisatie kan worden bereikt met behulp van verschillende methoden zoals blending, sonicatie of het gebruik van een Franse pers.
* Differentiële centrifugatie scheidt celcomponenten op basis van hun grootte en dichtheid. Het zwaardere organellen (zoals kernen) sediment eerst bij lagere snelheden, terwijl lichtere organellen (zoals ribosomen) sediment bij hogere snelheden.
2. Dichtheidsgradiënt Centrifugatie:
* Deze techniek verfijnt celfractionering door een gradiënt van oplossingen met toenemende dichtheid (bijv. Sucrose) te lagen over een monster van gehomogeniseerde cellen.
* De organellen migreren naar de dichtheidslaag die overeenkomt met hun eigen dichtheid, waardoor verdere zuivering mogelijk is.
3. Flowcytometrie:
* Deze techniek maakt gebruik van laserstralen om individuele cellen te analyseren en te sorteren op basis van hun grootte, vorm en fluorescentie -eigenschappen.
* Het kan worden gebruikt om specifieke celtypen te isoleren die de gewenste organel bevatten.
4. Immunoprecipitatie:
* Deze techniek gebruikt antilichamen om specifiek te binden aan doel -eiwitten geassocieerd met specifieke organellen.
* Door kralen te voegen die met de antilichamen zijn bedekt, kan de organel die het doel -eiwit bevat uit de oplossing worden getrokken.
5. Magnetische scheiding:
* Deze techniek maakt gebruik van magnetische kralen die zijn bedekt met antilichamen tegen specifieke organeleiwitten.
* De kralen binden aan de doelorganellen, waardoor ze kunnen worden geëxtraheerd met behulp van een magneet.
6. Affinity -chromatografie:
* Deze techniek gebruikt een kolom vol met een specifiek ligand dat bindt aan de doelorganel.
* De organellen binden aan het ligand, terwijl andere cellulaire componenten door de kolom passeren.
7. Microfluidics:
* Deze techniek maakt gebruik van microfluïdische apparaten om cellen en organellen te manipuleren en te scheiden op basis van grootte, vorm en oppervlakte -eigenschappen.
De keuze van de techniek hangt af van de specifieke organel die wordt geïsoleerd en de gewenste zuiverheid en kwantiteit.
Wetenschap © https://nl.scienceaq.com