1. Temperatuur:Enzymen hebben een optimale temperatuur waarbij ze maximale katalytische activiteit vertonen. Wanneer de temperatuur afwijkt van dit optimale, kan de enzymactiviteit worden beïnvloed:

- Hoge temperatuur:overmatige hitte kan ervoor zorgen dat enzymen denatureren, waardoor hun structuur en katalytische eigenschappen verloren gaan.

- Lage temperatuur:Lage temperaturen kunnen de enzymactiviteit vertragen, maar enzymen behouden over het algemeen hun structuur en kunnen weer volledig actief worden wanneer de temperatuur weer op het optimale bereik is gebracht.

2. pH:Enzymen hebben een specifiek pH-bereik waarbinnen ze het meest actief zijn. Afwijkingen van dit pH-bereik kunnen de ionisatietoestanden van aminozuren in het enzym veranderen, waardoor de substraatbinding en katalyse worden beïnvloed:

- Zure pH:Extreem zure omstandigheden kunnen enzymen denatureren door essentiële aminozuurresiduen te protoneren.

- Alkalische pH:Hoge pH-waarden kunnen ook de enzymstructuur verstoren door deprotonering te veroorzaken en de lading van aminozuurresiduen te veranderen.

3. Substraatconcentratie:Enzymactiviteit wordt beïnvloed door de concentratie van het substraat:

- Lage substraatconcentratie:Bij lage substraatconcentraties neemt de snelheid van enzymkatalyse toe naarmate er meer substraatmoleculen beschikbaar komen voor binding aan de actieve plaats van het enzym.

- Hoge substraatconcentratie:Bij zeer hoge substraatconcentraties kan de enzymactiviteit een plateau bereiken of afnemen. Dit komt omdat de actieve plaatsen van het enzym verzadigd raken met substraatmoleculen, en verdere verhogingen van de substraatconcentratie niet leiden tot een proportionele toename van de reactiesnelheid.