Science >> Wetenschap >  >> Biologie

Wat is de functie van ascorbinezuur bij DNA-extractie?

Ascorbinezuur, ook bekend als vitamine C, vervult verschillende functies bij DNA-extractie. Dit zijn de belangrijkste rollen:

1. Antioxidant:Ascorbinezuur is een krachtige antioxidant die DNA helpt beschermen tegen oxidatieve schade. Tijdens DNA-extractieprocedures kunnen verschillende reagentia en omgevingsfactoren reactieve zuurstofsoorten (ROS) genereren die DNA-oxidatie en strengbreuk kunnen veroorzaken. Ascorbinezuur vangt deze vrije radicalen op en minimaliseert DNA-schade, waardoor de integriteit van het geëxtraheerde genetische materiaal behouden blijft.

2. Reductiemiddel:Ascorbinezuur ondergaat redoxreacties en werkt als reductiemiddel bij DNA-extractie. Het helpt de reducerende omgeving in stand te houden die nodig is voor sommige DNA-extractiemethoden, vooral die waarbij gebruik wordt gemaakt van bepaalde lysisbuffers of chelaatvormers. Door de oxidatiemiddelen in de extractiebuffers te verminderen, voorkomt ascorbinezuur de oxidatie van DNA en vergemakkelijkt het de effectieve extractie ervan.

3. Remming van nucleasen:Nucleasen zijn enzymen die DNA kunnen afbreken, waardoor mogelijk de opbrengst en kwaliteit van het geëxtraheerde DNA in gevaar komt. Ascorbinezuur heeft remmende effecten op sommige nucleasen, zoals DNases en RNases. Door de activiteit van deze nucleasen te remmen, helpt ascorbinezuur de integriteit van DNA-moleculen tijdens het extractieproces te behouden, waardoor het risico op DNA-afbraak wordt verminderd.

4. Verbetering van DNA-precipitatie:Ascorbinezuur kan de precipitatie van DNA na extractie verbeteren. Dit is vooral relevant bij methoden waarbij alcoholprecipitatie wordt gebruikt om DNA te isoleren. Ascorbinezuur bevordert de vorming van strakke en compacte DNA-precipitaten, waardoor het gemakkelijker wordt om de DNA-pellet tijdens het centrifugeren te verzamelen. Dit vergemakkelijkt de daaropvolgende stappen van DNA-zuivering en stroomafwaartse toepassingen.

Over het geheel genomen draagt ​​ascorbinezuur bij aan de bescherming, stabilisatie en efficiënte extractie van DNA door te werken als een antioxidant, reductiemiddel, nucleaseremmer en precipitatieversterker. De opname ervan in DNA-extractieprotocollen helpt de integriteit en kwaliteit van het geëxtraheerde genetische materiaal voor verschillende toepassingen in de moleculaire biologie te garanderen.