Microbiologen bestuderen de karakteristieken van micro-organismen zoals algen, protozoa, bacteriën, schimmels en virussen met behulp van een microscoop. Hoewel sommige organismen zoals protozoa en gistcellen gemakkelijk te observeren zijn met behulp van een natte montage, vereisen bacteriële cellen vlekken. Wetenschappers hebben verschillende methoden ontwikkeld, zoals Gram-kleuring, zuurvaste kleuring en fluorescerende kleuring voor een betere visualisatie van bacteriële cellen en cellulaire structuren. Met behulp van dergelijke kleurmethoden is het mogelijk om structurele kenmerken te identificeren die helpen bij het classificeren van bacteriën.

Betere visualisatie

Bacteriële organismen zijn zo klein dat de meeste van hen alleen zichtbaar zijn onder een microscoop met een vergrotingsvermogen van 1000X. Een vergroting van de grootte biedt echter niet voldoende duidelijkheid, zodat de bacteriën daarom vóór de observatie moeten worden gekleurd om de voor visualisatie benodigde helderheid te bieden.

Identificatie en classificatie

Kleur bacteriën onderscheid tussen bacteriële typen staat bekend als differentiële kleuring. De Gram-kleuring is een dergelijke differentiële kleuring die onderscheid maakt tussen bacteriën op basis van hun celwandinhoud. In deze methode reageren de bacteriële cellen met een kristalviolette vlek om een ​​violette kleur op te nemen. Bij toevoeging van een ontkleuringmiddel verliezen sommige bacteriële cellen kleur, terwijl andere dat niet doen. Bij het toevoegen van safraninekleuring nemen de ontkleurde cellen de vlek op om rood te lijken, terwijl de bacteriecellen die geen kleurverlies hebben, violet blijven. De bacteriële cellen die de rode kleur opnemen, worden Gram-negatieve organismen genoemd en die cellen die de kleur niet opnemen, worden geclassificeerd als Gram-positieve organismen. Gram-kleuring biedt een snelle methode voor de initiële identificatie van bacteriën die betrokken zijn bij infecties. Evenzo helpt de zuurbevattende kleuringsprocedure om specifiek de organismen te identificeren die behoren tot de klasse van bacteriën die Mycobacteria worden genoemd, zoals Mycobacterium tuberculosis.

Detectie van levensvatbaarheid

In bacteriële kweekexemplaren is het vaak belangrijk om de aanwezigheid van levende bacteriële cellen te detecteren. Kleuringsmethoden zoals fluorescerende kleuring helpen om te identificeren of kweekcellen al dan niet levensvatbaar zijn. Levende bacteriën hebben het vermogen om de 5-Cyano-2,3-ditolyl-tetrazoliumchloride (CTC) -kleuring om te zetten in een kleurstof die een rode fluorescentie vertoont. Daarom, wanneer kweken die zijn gekleurd met CTC dergelijke fluorescentie uitzenden, duidt dit op de aanwezigheid van levensvatbare bacteriën. Propidium-jodide is een kleurstof die alleen werkt op niet-levende cellen met beschadigde membranen en daarom nuttig is bij het identificeren van dode bacteriële cellen.

Identificatie van celstructuren

Kleuring biedt een methode voor duidelijk visualiseren van verschillende cellulaire structuren. De Fuelgen-kleuringmethode maakt bijvoorbeeld identificatie van de kern in bacteriële cellen mogelijk, terwijl de vlek van Albert bruikbaar is voor het visualiseren van metachromatische korrels. Evenzo maakt de zilverimpregneringstechniek identificatie van spirocheten mogelijk. Flagella zijn gemakkelijk waar te nemen wanneer ze gekleurd zijn met Ryu's vlek. Malachietgroene kleuring helpt bij het identificeren van bacteriële sporen.