Hoewel ze niet met het blote oog kunnen worden gezien, zijn bacteriën overal aanwezig. Ze bestaan ​​in voedsel, grond, water, oppervlakken in onze huizen en in en op ons lichaam. Bacteriën bestaan ​​over het algemeen in gemengde populaties. Isolatie van een specifieke bacterie van andere bacteriesoorten in een bepaald monster maakt het voor microbiologen mogelijk om de structuur en functie ervan te bestuderen, kenmerken die bij de identificatie worden gebruikt. Microbiologen isoleren bacteriën vaak met behulp van een van de verschillende streak plate-technieken.

Tools

Een inentingslus wordt gebruikt om micro-organismen over te brengen. Het bestaat uit een nichrome of platina draad met een kleine, cirkelvormige lus aan het ene uiteinde. Het andere uiteinde is recht en schuift in een handvat. Er zijn ook plastic wegwerp-entlussen beschikbaar. Bacteriën kunnen alleen geïsoleerd worden als ze groeien. Microbiologen kweken bacteriën voor isolatie van streakplaten in ondiepe, ronde petrischalen gevuld met een vast medium, agar genaamd. Agar bootst de omgeving na waarin de bacteriën van nature groeien. De met media gevulde schalen zijn steriel en worden omhuld om de groei van ongewenste organismen te voorkomen. Tijdens de isolatie van de streakplaten wordt de entlus herhaaldelijk gesteriliseerd in de vlam van een bunsenbrander.

Principe

De streak plate-techniek is de meest populaire methode voor het isoleren van specifieke bacteriën uit een monster met een mengsel van micro-organismen. De techniek verdunt in wezen het aantal organismen en vermindert hun dichtheid. Hiermee kunnen microbiologen individuele bacteriekolonies onderscheiden en isoleren. Een kolonie is een zichtbare groep bacteriën. Alle bacteriën in een enkele kolonie zijn afkomstig van dezelfde bacteriecel. Bijgevolg zijn individuele kolonies "zuivere" kolonies. De zuivere kolonie wordt overgebracht naar een andere plaat om een ​​zuivere kweek te produceren die uit één type bacterie bestaat.

Procedure

Wanneer het goed wordt gedaan, verdunt streak plate-isolatie een monster en maakt individuele bacteriële cellen mogelijk om ontwikkelen tot geïsoleerde kolonies. Een microbioloog begint met het steriliseren van de entdraad in een vlam. Ze koelt de lus af door hem aan te raken op de agar, dompelt vervolgens de lus in het monster en spreidt deze heen en weer om een ​​deel van de plaat te bedekken. Ze steriliseert de lus, koelt deze en ent een tweede aangrenzend gedeelte van de plaat door de lus enkele malen door de eerste sectie te slepen en de tweede sectie te bedekken met een zigzagbeweging. Hierdoor wordt een klein aantal bacteriën uit het eerste deel opgepakt en overgebracht naar het tweede gedeelte. Het aantal keren dat deze basisprocedure wordt herhaald, is afhankelijk van de gebruikte methode met de streak-plate. Ondanks de methode, wordt het originele monster gebruikt om alleen het eerste deel van de plaat te inoculeren.

Methoden

Streak-plate-methoden variëren door het aantal gestripte agar-coupes. De T-streak-methode maakt gebruik van drie secties: de bovenste helft en twee onderste bodems van gelijke grootte. Het initiële inoculum wordt in de bovenste helft van de plaat geplaatst. Bacteriën worden van het bovenste gedeelte naar een van de onderste secties gesleept en vervolgens van dat onderste gedeelte naar het andere. In de kwadrantmethode zijn vier gedeelten van gelijke grootte gestreept. De continue strookmethode omvat typisch het inoculeren van de bovenste helft van de plaat, het 180 graden draaien, en het inoculeren van de andere helft van de plaat zonder de lus te steriliseren of bacteriën uit de vorige sectie te slepen.