Materialen:

1. Gedeïoniseerd water

2. Kaliumdiwaterstoffosfaat (KH2PO4)

3. Natriumwaterstoffosfaat (Na2HPO4)

4. pH-meter

5. Magnetische roerder of roerstaafje

6. Maatkolf (bijvoorbeeld 1000 ml)

7. Maatcilinder of pipet

Reagentia:

1. 0,2 M kaliumdiwaterstoffosfaat (KH2PO4) oplossing:Los 17,41 g KH2PO4 op in 1000 ml gedeïoniseerd water.

2. 0,2 M natriumwaterstoffosfaat (Na2HPO4) oplossing:Los 28,48 g Na2HPO4 op in 1000 ml gedeïoniseerd water.

Procedure:

1. Bereken de volumes van 0,2 M KH2PO4- en 0,2 M Na2HPO4-oplossingen die nodig zijn om 1000 ml 0,1 M fosfaatbuffer bij pH 7,5 te bereiden. Gebruik de Henderson-Hasselbalch-vergelijking:

pH =pKa + log ([A-]/[HA])

waar:

- pH is de gewenste pH (7,5)

- pKa is de dissociatieconstante van fosforzuur (7.21)

- [A-] is de concentratie van de geconjugeerde base (Na2HPO4)

- [HA] is de concentratie van het zwakke zuur (KH2PO4)

De vergelijking herschikken en de waarden vervangen:

log ([A-]/[HA]) =pH - pKa =7,5 - 7,21 =0,29

[A-]/[HA] =antilog (0,29) =1,959

Bepaal uit de gewenste bufferconcentratie (0,1 M) en de berekende verhouding ([A-]/[HA]) de volumes van de 0,2 M KH2PO4- en 0,2 M Na2HPO4-oplossingen:

V (KH2PO4) =[HA] / [Totale concentratie] * Totaal volume

=0,1 M / (0,1 M + 0,1 M) * 1000 ml

=500 ml

V (Na2HPO4) =[A-] / [Totale concentratie] * Totaal volume

=0,1 M / (0,1 M + 0,1 M) * 1000 ml

=500 ml

2. Breng 500 ml 0,2 M KH2PO4-oplossing over in een maatkolf van 1000 ml.

3. Voeg 500 ml 0,2 M Na2HPO4-oplossing toe aan de maatkolf.

4. Draai de kolf voorzichtig rond om de oplossingen te mengen.

5. Controleer de pH van de buffer met een pH-meter. Pas de pH aan tot 7,5 door indien nodig kleine volumes van 0,2 M KH2PO4- of 0,2 M Na2HPO4-oplossingen toe te voegen.

6. Voeg indien nodig gedeïoniseerd water toe om het eindvolume van de buffer op 1000 ml te brengen.

7. Meng de buffer grondig met een magneetroerder of roerstaafje.

Uw 0,1 M fosfaatbuffer van pH 7,5 is nu klaar voor gebruik. Bewaar de buffer op de juiste temperatuur voor uw experimentele omstandigheden.