Tijdens dunnelaagchromatografie plaatst een technicus vlekken van een chemisch mengsel op een vlakke plaat bedekt met een laag absorberend materiaal en plaatst vervolgens het onderste gedeelte van de plaat in oplosmiddel. Wanneer het oplosmiddel de plaat op beweegt, gaan de chemicaliën in het mengsel met verschillende snelheden mee, dus scheiden ze zich. Deze test kan bepalen welke chemicaliën er in een mengsel zitten door de verplaatsingssnelheid van onbekenden te vergelijken met bekende standaarden. De resultaten kunnen echter door veel factoren worden beïnvloed.

Retentiefactoren

De retentiefactor voor een chemische stof tijdens dunnelaagchromatografie is een maatstaf voor hoe ver het op de plaat beweegt als reactie op de beweging van het oplosmiddel. Omdat de absolute beweging van de chemische stof afhangt van hoe ver het oplosmiddel mocht bewegen, worden retentiefactorwaarden berekend met betrekking tot de mate van oplosmiddelbeweging. De retentiefactor voor een chemische stof is de verticale afstand die wordt verplaatst door de chemische stof vanaf de plek waar deze oorspronkelijk op de plaat is aangebracht, gedeeld door de afstand die het oplosmiddel heeft afgelegd - gemeten vanaf hetzelfde beginpunt.

Dunne laag Chromatografieplaat

De dunnelaagchromatografieplaat zelf kan de retentiefactorwaarde beïnvloeden die voor een bepaalde chemische stof wordt verkregen. Dunne-laag-chromatografieplaten kunnen worden gecoat met een verscheidenheid aan absorberende vaste stoffen; meestal silica of alumina. Omdat de retentiefactor is gebaseerd op de relatieve affiniteit van de chemische stof voor het absorbens in vergelijking met het oplosmiddel, kan het veranderen van het absorptiemiddel de retentiefactor sterk veranderen. Ook kunnen de dikte en uniformiteit van de absorptielaag variëren van plaat tot plaat, vooral als ze met de hand worden gemaakt, wat soms het geval is. Deze twee factoren kunnen ook de retentiefactorwaarde voor chemicaliën wijzigen.

Oplosmiddelen

Omdat het oplosmiddel de chemische stof op de plaat draagt, heeft het gebruikte oplosmiddel ook een aanzienlijke invloed op de retentiefactor. waarde voor de chemische stof. Een oplosmiddel dat een sterkere interactie heeft voor een bepaalde chemische stof zal gemakkelijker elke affiniteit van de chemische stof voor de absorberende laag overwinnen, en die chemische stof verder in een gegeven tijdsperiode verder verplaatsen. Mengsels van oplosmiddelen kunnen ook verschillende effecten hebben, afhankelijk van de verhouding van elk oplosmiddel.

Andere factoren

Er zijn enkele andere factoren die de retentiefactor in sommige gevallen kunnen beïnvloeden. De temperatuur van het oplosmiddel en de plaat kan kleine veranderingen veroorzaken, omdat het oplosmiddel bijvoorbeeld vaak beter de chemicaliën kan oplossen die het bij hogere temperaturen transporteert. De techniek van de technicus bij het aanbrengen van het monster op de plaat kan ook de retentiefactor veranderen. Een mogelijk effect is dat het aanbrengen van te veel monsters ertoe leidt dat grote, diffuse chemische banden de plaat opgaan, waardoor het moeilijk wordt om de afstand die de chemische stof heeft getransporteerd nauwkeurig te meten.