Escherichia coli, E. coli, is een bacterie die groeit in de lagere darmen van zoogdieren. Deze bacterie werd voor het eerst ontdekt aan het einde van de 19e eeuw. Sindsdien heeft het een lange geschiedenis van gebruik in wetenschappelijk onderzoek. Het is het meest gebruikte organisme in moleculaire genetica. Een deel van de reden dat E. coli veel wordt gebruikt in wetenschappelijk onderzoek, is dat het gemakkelijk is om te groeien in een laboratorium. De factoren die E. coli gemakkelijk laten groeien, zijn de eenvoudige voedingsbehoeften, de snelle groeisnelheid en de matige onderhoudsvereisten.

Steriliseer de inentingslus door deze in de vlam van de bunsenbrander te plaatsen. Leid de onderste helft van de lus door de vlam totdat deze rood gloeit.

Laat de lus afkoelen. U kunt het aanraken op de steriele agar op de plaat om te controleren of deze is afgekoeld. Plaats de lus niet op de tafel of laat het niet in contact komen met iets anders dan steriele agar of de gewenste cultuur nu het is gesteriliseerd.

Doop de lus in de E. coli-cultuur en verwijder deze.

Open de agarplaat en schuif de lus voorzichtig heen en weer over het oppervlak van een deel van de agar. Zorg ervoor dat je niet door de agar krast met de lus. De agar levert de voedingsstoffen die de E. coli nodig hebben om te groeien.

Plaats de lus opnieuw in de vlam van de bunsenbrander om deze te steriliseren. Zodra de lusstaaf is afgekoeld, raakt u hem aan op een steriel gedeelte van de plaat om ervoor te zorgen dat deze kouder is en laat u vervolgens de lus door uw eerste streep glijden om een ​​tweede streep te maken. Deze tweede reeks is een verdunde versie van de eerste reeks. Herhaal dit sterilisatie- en glijproces totdat verschillende secties van de agarplaat zijn overgegleden. De reden dat je dit doet is zodat je later kunt kiezen uit enkele, klonale kolonies. Dit zal helpen ervoor te zorgen dat je tenminste één sectie hebt met individuele kolonies - niet te geconcentreerd (die te veel groei zal hebben, en je niet toestaat om uit een enkele kolonie te kiezen) en niet te verdund (wat geen kolonies zou geven) .

Steriliseer de lus nog een keer in de vlam voordat u deze opzij legt in het werkgebied.

Plaats de bovenkant terug op de agarplaat. Draai de plaat ondersteboven en plaats deze in de incubator ingesteld op 37 graden Celsius (98,6 graden Fahrenheit). Deze ideale incubatietemperatuur simuleert de temperatuur van het menselijk lichaam waar E. coli verblijft. Binnen 24 tot 48 uur zullen zichtbare kolonies van E. coli-bacteriën in de agarplaat verschijnen.

Waarschuwing

Een juiste insluiting van de E. coli-monsters en sterilisatie van de inentingslus zal de kans om de bacteriën te verspreiden. In het experimentgebied mag geen voedsel of drank worden geconsumeerd. Het dragen van handschoenen zal het risico op handbesmetting verder verminderen.