Ketonen zijn van groot belang als bouwstenen in de synthetische organische chemie en biokatalyse. De meeste ketonen kunnen niet gemakkelijk kwantitatief worden bepaald vanwege het ontbreken van zichtbare fotometrische eigenschappen. Effectieve high-throughput assay (HTA) ontwikkeling is daarom noodzakelijk voor ketonbepaling.

De groep van prof. Sun Zhoutong van het Tianjin Institute of Industrial Biology van de Chinese Academie van Wetenschappen heeft een colorimetrische methode ontwikkeld voor het snel detecteren van structureel diverse ketonen door paramethoxy-2-aminobenzamidoxime (PMA) als chemische sonde te gebruiken.

Het op PMA gebaseerde systeem maakt fluorescentiescreening mogelijk die vrij gevoelig is (tot μM-bereik), compatibel met waterige systemen en een breed pH-bereik. Er kunnen verschillende ketonen worden gebruikt, vooral die met elektronenrijke en sterisch kleine substituenten. De eenvoudig te bedienen test kan worden uitgevoerd in een plaat met 96 putjes bij kamertemperatuur met normale laboratoriumapparatuur.

Verder, de ontwikkelde high-throughput-assay (HTA) werd met succes gebruikt bij de ontdekking van enzymen op basis van mijnbouw met verhoogde oxidatieactiviteit naar secundaire alcoholen en in de gerichte evolutie van een alcoholdehydrogenase gericht op het verbeteren van de katalytische activiteit met behulp van ketonen als substraten of producten.

Dit werk biedt een algemeen hulpmiddel voor ketondetectie bij de ontwikkeling van biokatalysatoren.

De studie, getiteld "A High-Throughput Fluorescence Assay for keton Detection and its Applications in Enzyme Mining and Protein Engineering, " is gepubliceerd in ACS Omega .