science >> Wetenschap >  >> Chemie

Wat zijn de voordelen van HPLC over GC?

Chromatografische technieken worden in wetenschappelijke laboratoria uitgevoerd om chemische verbindingen van een onbekend monster te scheiden. Het monster wordt opgelost in een oplosmiddel en stroomt door een kolom, waarin het wordt gescheiden door de aantrekking van de verbinding tegen het materiaal van de kolom. Deze polaire en niet-polaire aantrekking tot het kolommateriaal is de actieve kracht die ervoor zorgt dat de verbindingen na verloop van tijd scheiden. De twee soorten chromatografie die tegenwoordig worden gebruikt, zijn gaschromatografie (GC) en hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC).

Mobiele draaggolffase

Gaschromatografie verdampt het monster en wordt langs het systeem getransporteerd door een inert gas zoals helium. Het gebruik van waterstof zorgt voor een betere scheiding en efficiëntie, maar veel laboratoria verbieden het gebruik van dit gas vanwege de ontvlambare aard ervan. Bij gebruik van vloeistofchromatografie blijft het monster in zijn vloeibare toestand en wordt het onder hoge drukken door de kolom geduwd door verschillende oplosmiddelen zoals water, methanol of acetonitril. Verschillende concentraties van elk oplosmiddel zullen de chromatografie van elke verbinding anders beïnvloeden. Als het monster in vloeibare toestand blijft, neemt de stabiliteit van de verbinding toe.

Kolomtype

Kolommen voor gaschromatografie hebben een zeer kleine inwendige diameter en hun lengte kan variëren van 10 tot 45 meter. Deze kolommen op silicabasis worden opgerold langs een cirkelvormig metalen frame en verwarmd tot een temperatuur van 250 graden Fahrenheit. Vloeistofchromatografiekolommen zijn ook op silica gebaseerd, maar hebben een dikke metalen behuizing om grote hoeveelheden interne druk te weerstaan. Deze kolommen werken op kamertemperatuur en variëren van 50 tot 250 centimeter.

Samengestelde stabiliteit

Bij gaschromatografie wordt het in het systeem geïnjecteerde monster verdampt bij ongeveer 400 graden Fahrenheit voordat het wordt gedragen door de kolom. Aldus moet de verbinding bestand zijn tegen warmte bij hoge temperaturen zonder af te breken of af te breken in een ander molecuul. Met vloeistofchromatografische systemen kan de wetenschapper grotere en minder stabiele verbindingen analyseren omdat het monster niet wordt blootgesteld aan hitte.