Door Elliot Walsh, bijgewerkt op 24 maart 2022

Bacteriën zijn de meest productieve organismen op aarde, met meer dan een biljoen soorten en meer dan vijf miljoen biljoen biljoen individuen. Hoewel minder dan 1% van deze microben bij mensen ziekten veroorzaakt, kunnen ze variëren van milde maagklachten tot levensbedreigende infecties zoals de builenpest, die in de 14e eeuw naar schatting 50 miljoen mensen het leven kostte.

Antibiotica en hun werkingsmechanismen

Antibiotica richten zich selectief op bacteriële structuren en processen, waardoor menselijke cellen worden gespaard. Veel voorkomende klassen zijn onder meer:

• Bètalactams (bijvoorbeeld penicilline) verstoren de celwandsynthese, wat leidt tot bacteriële lyse.
• Macroliden (bijvoorbeeld erytromycine) binden bacteriële ribosomen, waardoor de eiwitsynthese wordt geblokkeerd.
• Quinolonen interfereren met de DNA-replicatie door gyrase en topoisomerase IV te remmen.

Antibioticaresistentie testen

Sinds de jaren twintig van de vorige eeuw hebben bacteriën resistentie ontwikkeld, wat aanleiding gaf tot de ontwikkeling van gestandaardiseerde gevoeligheidstesten. Vroege methoden omvatten seriële verdunningen van bacterieculturen op met antibiotica beladen platen, wat tijdrovend en variabel was.

De Kirby-Bauer schijfdiffusietest

De Kirby-Bauer-test, gestandaardiseerd door microbiologen W.M.M.Kirby en A.W.Bauer, blijft de gouden standaard voor snelle, betrouwbare resistentiescreening. De procedure is eenvoudig:

1. Streef een zuiver bacterie-isolaat uit op een agarplaat.
2. Plaats met antibiotica beladen schijven op het oppervlak; elke schijf bevat een specifiek antibioticum.
3. Incubeer de plaat onder optimale omstandigheden.

Terwijl het antibioticum naar buiten diffundeert, worden gevoelige bacteriën geremd, waardoor rond elke schijf een helder, cirkelvormig gebied zonder groei ontstaat, ook wel de remmingszone genoemd. De grootte van deze zone weerspiegelt rechtstreeks de bacteriële gevoeligheid:grotere zones duiden op een grotere gevoeligheid; kleinere zones duiden op weerstand.

Het meten van de remmingszone

Nauwkeurige metingen zijn van cruciaal belang voor het interpreteren van resultaten. Volg deze stappen:

1. Plaats de agarplaat op een niet-reflecterend oppervlak.
2. Plaats met een millimeterliniaal of schuifmaat de nulmarkering in het midden van de antibioticaschijf.
3. Meet vanaf het midden van de schijf tot de buitenrand van de remmingszone (straal). Vermenigvuldig met twee om de diameter te verkrijgen, of meet direct over de zone (diameter).

Alle metingen moeten worden geregistreerd in millimeters (mm).

Gebruik de CLSI-referentietabellen om de diameter ten opzichte van bacteriesoorten en antibiotica te interpreteren. Deze grafieken zijn hier te vinden .