Science >> Wetenschap >  >> Biologie

Waarom moet je het plasmide- en cel -DNA snijden met hetzelfde restrictie -enzym?

U moet het plasmide- en cel -DNA snijden met hetzelfde restrictie -enzym om een ​​cruciale reden in genetische manipulatie: om compatibele uiteinden te creëren die tegen elkaar kunnen worden geligeerd.

Dit is waarom:

1. Beperkingsenzymen zijn als moleculaire schaar die specifieke DNA -sequenties (restrictieplaatsen) herkennen en het DNA op die locaties snijden.

2. Elke restrictie -enzym snijdt DNA op een specifieke manier , het achterlaten van "plakkerige uiteinden" (korte enkelstrengige overhangen) of "stompe uiteinden" (geen overhangen).

3. Het doel van genetische manipulatie is het invoegen van een gen van belang (uit het cel -DNA) in een plasmide (een klein cirkelvormig stuk DNA) .

4. om zich bij deze twee stukken DNA aan te sluiten , hun uiteinden moeten compatibel zijn. Dit betekent dat ze beide plakkerige uiteinden moeten hebben met complementaire sequenties of beide stompe uiteinden hebben.

5. Het snijden van zowel het plasmide als het cel -DNA met hetzelfde restrictie -enzym zorgt ervoor dat de resulterende fragmenten compatibele uiteinden zullen hebben. Hierdoor kan het belang van belang in het plasmide worden ingevoegd, waardoor een recombinant plasmide wordt gecreëerd dat vervolgens in een gastheercel kan worden geïntroduceerd.

Samenvattend: Het snijden van zowel het plasmide- als het cel -DNA met hetzelfde restrictie -enzym creëert complementaire uiteinden die aan elkaar kunnen worden geligeerd, waardoor het ale -gen van belang in het plasmide kan worden ingevoegd. Dit is een fundamentele stap in veel technieken voor genetische technologie.