Science >> Wetenschap >  >> Biologie

Waarom groeien de cellen getransformeerd met PUC18 en Plasmide Lux in aanwezigheid van ampicilline?

De cellen getransformeerd met PUC18 en plasmide Lux groeien in aanwezigheid van ampicilline omdat ze het ampicillineresistentiegen (AMPR) bezitten aanwezig in het plasmide. Hier is de uitsplitsing:

* PUC18: Dit is een kloneringsvector, een klein DNA -molecuul dat wordt gebruikt om buitenlands DNA in bacteriën te dragen. Het bevat een *oorsprong van replicatie *, waardoor het in de hostcel kan repliceren en een *meervoudige kloneringssite *waar buitenlands DNA kan worden ingevoegd.

* AMPR -gen: Dit gen codeert voor een enzym genaamd beta-lactamase , die ampicilline afbreekt, een gemeenschappelijk antibioticum.

* Transformatie: Wanneer bacteriën worden getransformeerd met PUC18, verwerven ze het AMPR -gen samen met het plasmide. Dit gen wordt tot expressie gebracht en produceert bèta-lactamase.

* ampicillineresistentie: De geproduceerde bèta-lactamase inactiveert het ampicilline in het groeimedium, waardoor de getransformeerde bacteriën kunnen overleven en groeien in aanwezigheid van het antibioticum.

Samenvattend:

* Het PUC18 -plasmide draagt ​​het AMPR -gen.

* Transformeerde bacteriën brengen het AMPR-gen tot expressie en produceert bèta-lactamase.

* Beta-lactamase degradeert ampicilline, waardoor de bacteriën resistent zijn tegen het antibioticum.

Daarom zullen alleen de getransformeerde cellen die het PUC18-plasmide dragen overleven en groeien op een ampicilline-bevattend medium. Deze selectieve druk wordt gebruikt om ervoor te zorgen dat alleen de cellen die het plasmide met succes hebben opgenomen, worden geselecteerd voor verder onderzoek of manipulatie.