1. Voorbereiding van het monster:

* DNA wordt geëxtraheerd uit cellen en vervolgens verteerd met restrictie -enzymen. Deze enzymen snijden DNA bij specifieke sequenties, waardoor fragmenten van verschillende groottes ontstaan.

* De DNA -fragmenten worden vervolgens gemengd met een laadbuffer met een kleurstof (meestal bromofenolblauw) voor zichtbaarheid en een dichte oplossing (zoals glycerol) om hen te helpen in de gel te zinken.

2. gelbereiding:

* Een gel wordt gemaakt met behulp van een poreus materiaal zoals agarose of polyacrylamide. De gel fungeert als een zeef, waardoor kleinere DNA -fragmenten er gemakkelijker door kunnen bewegen dan grotere fragmenten.

* De gel wordt geplaatst in een elektroforese kamer gevuld met een bufferoplossing die elektriciteit leidt.

3. elektroforese:

* De DNA -monsters worden aan het ene uiteinde van de gel in putten geladen.

* Een elektrische stroom wordt over de gel aangebracht.

* DNA is negatief geladen, dus het migreert naar de positieve elektrode.

* Kleinere DNA -fragmenten bewegen sneller door de gel dan grotere fragmenten, wat resulteert in een scheiding op basis van grootte.

4. Visualisatie:

* Na elektroforese worden de DNA -fragmenten gekleurd met een fluorescerende kleurstof (zoals ethidiumbromide of SYBR -groen) die bindt aan DNA en kan worden gevisualiseerd onder UV -licht.

* De DNA -fragmenten verschijnen als banden op de gel, met kleinere fragmenten die verder in de gel verschijnen.

Andere methoden voor het scheiden van DNA -segmenten van verschillende lengtes:

* chromatografie: Deze methode gebruikt verschillende eigenschappen van de DNA -fragmenten om ze te scheiden, zoals hun affiniteit voor een stationaire fase.

* capillaire elektroforese: Vergelijkbaar met gelelektroforese maar gebruikt een smalle capillaire buis in plaats van een gel. Deze methode biedt een hogere resolutie en snellere scheiding.

* Field-Flow Fractionation (FFF): Deze techniek scheidt moleculen op basis van hun grootte- en diffusie -eigenschappen. Het gebruikt een laminaire stroom van een dragervloeistof en een veld (zoals een zwaartekracht- of elektrisch veld) om deeltjes te scheiden.

Toepassingen van DNA -scheiding:

* Genetische analyse: Het identificeren van mutaties, genetische aandoeningen en vaderschapstesten.

* Forensics: Bijpassende DNA -monsters van plaats delicten tot verdachten.

* onderzoek: Het bestuderen van genexpressie, genregulatie en eiwitinteracties.

* Biotechnologie: Het ontwikkelen van nieuwe medicijnen en diagnostische hulpmiddelen.

De keuze van de methode voor het scheiden van DNA -segmenten is afhankelijk van de specifieke toepassing en het groottebereik van de onderzochte fragmenten.