Naarmate de vergroting van een microscoop toeneemt, neemt de helderheid van de waargenomen objecten af. Dit komt omdat het licht over een groter gebied wordt verspreid, wat resulteert in een zwakker beeld. Bovendien geldt dat hoe hoger de vergroting, hoe waarschijnlijker het is dat er licht verloren gaat als gevolg van reflectie, absorptie en verstrooiing, waardoor de helderheid van het beeld verder afneemt.