Science >> Wetenschap >  >> Fysica

Hoe wordt een spectrofotometer gekalibreerd?

Spectrofotometer kalibratie:een stapsgewijze gids

Spectrofotometers zijn essentiële hulpmiddelen voor het meten van de absorptie en overdracht van licht door een monster, waardoor waardevolle informatie wordt geboden in velden zoals chemie, biologie en geneeskunde. Nauwkeurige kalibratie is cruciaal om betrouwbare en precieze metingen te garanderen. Hier is een uitsplitsing van het proces:

1. Golflengte kalibratie:

* Een standaard gebruiken: Dit is de meest voorkomende methode. Een bekende standaard met een specifieke absorptiepiek bij een bekende golflengte (bijv. Holmiumoxidefilter, Didymium -filter) wordt gebruikt.

* Procedure:

* De standaard wordt geplaatst in het straalpad van de spectrofotometer.

* De golflengte van het instrument wordt aangepast totdat de maximale absorptie is opgenomen.

* Het instrument wordt vervolgens gekalibreerd naar de bekende golflengte van de piek van de standaard.

* Belang: Zorgt ervoor dat het instrument nauwkeurig de golflengten van het licht identificeert dat het gebruikt voor meting.

2. Absorptie/transmissiekalibratie:

* Een blanco gebruiken: Een blanco is een oplossing die alle componenten van het monster bevat, behalve dat de analyt wordt gemeten.

* Procedure:

* De blanco wordt geplaatst in het straalpad van de spectrofotometer.

* Het instrument is ingesteld om 100% transmissie of 0 absorptie te lezen (afhankelijk van het instrument).

* Dit bepaalt de basislijn voor alle volgende metingen.

* Belang: Deze kalibratiestap corrigeert voor enige absorptie of transmissie veroorzaakt door het oplosmiddel of andere componenten in het monster die niet de analyt van belang zijn.

3. Instrumentspecifieke kalibratie:

* Kalibratienormen: Sommige spectrofotometers vereisen specifieke kalibratienormen (bijv. Oplossingen met bekende concentraties van specifieke analyten).

* Procedure:

* Meet de absorptie of transmissie van de normen met behulp van de spectrofotometer.

* Voer deze metingen in in de software van het instrument.

* Het instrument creëert dan een kalibratiecurve, die de absorptie of transmissie relateert aan concentratie.

* Belang: Staat het instrument in staat om absorptie- of transmissie -metingen direct om te zetten in concentratiemetingen voor specifieke analyten.

extra tips:

* Regelmatige kalibratie: Frequente kalibratie (dagelijks of wekelijks) is essentieel om de nauwkeurigheid te behouden.

* Juist onderhoud: Door het instrument schoon te houden en vrij van stof, vingerafdrukken en krassen is van vitaal belang voor optimale prestaties.

* Gebruik van hoogwaardige normen en reagentia: De nauwkeurigheid van kalibratie hangt af van de kwaliteit van de gebruikte normen en de gebruikte reagentia.

* Temperatuurregeling: Sommige spectrofotometers vereisen een stabiele temperatuuromgeving voor nauwkeurige metingen.

Opmerking: De specifieke kalibratieprocedures en frequentie kunnen variëren, afhankelijk van het spectrofotometer -model en het beoogde gebruik ervan. Raadpleeg altijd de handleiding van het instrument voor gedetailleerde instructies.