Science >> Wetenschap >  >> Chemie

Wat is de functie van natriumcitraat bij DNA -isolatie?

Natriumcitraat speelt een cruciale rol in DNA -isolatie door te fungeren als een chelator , wat betekent dat het bindt aan en verwijdert metaalionen van oplossing. Dit is om verschillende redenen belangrijk:

1. Inactivering van dnases:

* DNases zijn enzymen die DNA afbreken. Veel DNases vereisen metaalionen zoals magnesium (mg 2+ ) als cofactors voor hun activiteit.

* Natriumcitraat bindt aan deze metaalionen, waardoor ze niet beschikbaar zijn voor de DNases, waardoor hun activiteit effectief wordt geremd en het DNA tegen afbraak wordt beschermd.

2. Preventie van DNA -neerslag:

* DNA is negatief geladen, en in aanwezigheid van hoge concentraties van metaalionen kan het uit oplossing neerslaan.

* De chelerende werking van natriumcitraat voorkomt deze neerslag door de concentratie van vrije metaalionen te verminderen, waardoor DNA kan worden opgelost en gemakkelijker te isoleren.

3. Verbeterde lysis -efficiëntie:

* Sommige DNA -isolatieprotocollen omvatten het gebruik van wasmiddelen voor lyse -cellen en geven DNA af.

* Natriumcitraat kan helpen de lysis -efficiëntie te verbeteren door de vorming van micellen, structuren te bevorderen die celmembranen kunnen inkapselen en afbreken.

Over het algemeen draagt ​​natriumcitraat bij aan een succesvolle DNA -isolatie door:

* Bescherming van DNA tegen afbraak door DNases te remmen.

* Het voorkomen van DNA -neerslag en het waarborgen van de oplosbaarheid ervan.

* Verbetering van cellysis en DNA -afgifte.

Samenvattend is natriumcitraat een waardevol reagens in DNA -isolatie door de integriteit en beschikbaarheid van DNA te waarborgen door zijn chelerende eigenschappen.