Jupiterimages/Photos.com/Getty Images

Het menselijk lichaam herbergt grofweg negen keer meer bacteriële cellen dan menselijke cellen. In de microbiologie:een zuivere cultuur verwijst naar een laboratoriumpreparaat, zoals een petrischaaltje, dat één enkele bacteriesoort bevat. Het identificeren en isoleren van deze soort is essentieel voor nauwkeurige karakterisering en verdere toepassingen.

John Foxx/Stockbyte/Getty Images

1. Steriliseer de inentingslus

Steek een bunsenbrander aan en voer de entlus door het heetste deel van de vlam totdat deze rood gloeit. Deze stap elimineert alle resterende microben.

2. Neem bacteriën op

Laat de lus ongeveer 10 seconden afkoelen en dompel hem vervolgens voorzichtig in het microbiële monster.

3. Eerste reeks

Open de agarplaat en veeg de lus heen en weer over ongeveer een derde van het oppervlak van de plaat. Steriliseer de lus in de vlam opnieuw.

4. Tweede reeks

Raak met de lus een niet-geënt gebied van de agar aan om deze af te koelen. Draai de plaat zodat het geïnoculeerde gedeelte links of rechts ligt en schuif vervolgens de lus meerdere keren door het geïnoculeerde gebied en over het bovenste derde deel van het resterende oppervlak. Steriliseer de lus opnieuw.

5. Derde reeks

Koel de lus af op een schoon gedeelte van de agar, draai de plaat nog eens 90° en sleep de lus door de eerder geïnoculeerde zone voordat u over het resterende niet-geïnoculeerde gebied veegt.

6. Incubeer de plaat

Plaats de plaat in een incubator (of op kamertemperatuur) en wacht tot er zichtbare kolonies verschijnen – doorgaans 24 tot 48 uur of langer, afhankelijk van het organisme.

7. Breng de geïsoleerde bacteriën over

Steriliseer een nieuwe entlus opnieuw. Raak een enkele, goedgevormde kolonie op de plaat aan en breng deze vervolgens over naar een schuine agarbuis of een tube voedingsbouillon.

8. Broed de pure cultuur uit

Incubeer de bouillon of de bouillon onder dezelfde omstandigheden als voorheen. Na voldoende groei zal de kweek een puur bacteriepreparaat zijn.

Dingen die nodig zijn

• Microbieel monster
• Inentingslus
• Bunsenbrander
• Agarplaat
• Agar-schuine buis of voedingsbouillon

TL;DR (te lang; niet gelezen)

Het in opeenvolgende fasen uitstrijken van een plaat verdunt de bacteriële lading, waardoor individuele kolonies kunnen ontstaan. Voorkom overmatige kruisbesmetting tussen streepzones. Incubatie kan plaatsvinden bij kamertemperatuur, maar het gebruik van een gecontroleerde incubator optimaliseert de groeiomstandigheden voor het specifieke organisme.

Waarschuwing

Bij het werken met onbekende micro-organismen staat veiligheid voorop:draag handschoenen, steriliseer oppervlakken grondig na blootstelling en zorg ervoor dat de entlus voor en na elke stap wordt gesteriliseerd.

Br
Br
Br