DNA in cellysaat wordt zichtbaar door een proces genaamd neerslag , waarbij het DNA wordt gescheiden van de rest van de celcomponenten en vervolgens zichtbaar wordt gemaakt. Hier is een uitsplitsing:

1. Cellysis:

* Cellen worden open gebroken en laten hun inhoud vrij, inclusief DNA.

* Dit kan worden gedaan met behulp van verschillende methoden, zoals:

* wasmiddelen: Verstuur celmembranen en geef de inhoud vrij.

* enzymen: Breek eiwitten af, waardoor DNA wordt afgegeven.

* Mechanische methoden: Zoals sonicatie of kralen kloppen, verstoren fysiek cellen.

2. Verwijdering van cellulair puin:

* Na cellysis bevat het lysaat een mengsel van cellulaire componenten.

* Om DNA te isoleren, moeten andere componenten zoals eiwitten en lipiden worden verwijderd. Dit kan worden bereikt door:

* Centrifugatie: Het draaien van het lysaat bij hoge snelheden scheidt componenten op basis van dichtheid. DNA is meestal in het supernatant.

* Digestie: Enzymen zoals proteïnase k breken eiwitten af.

* Salting: Zout toevoegen aan het lysaat, dat eiwitten neerslaat maar DNA in oplossing laat.

3. Neerslag van DNA:

* Het DNA wordt vervolgens uit de oplossing neergeslagen, waardoor het zichtbaar is. Dit wordt meestal gedaan met behulp van ethanol of isopropanol .

* Deze alcoholen zijn minder polair dan water, waardoor het DNA samen klonter en een zichtbaar neerslag vormen.

* De toevoeging van zout kan de neerslag verder verbeteren door de negatieve ladingen op het DNA -molecuul te neutraliseren.

4. Visualisatie:

* Het neergeslagen DNA wordt vervolgens verzameld, meestal door het rond een glazen staaf te spoelen of een pipet te gebruiken.

* Het DNA verschijnt als een witte, vezelige massa Omdat het zeer opgerold en met elkaar verweven is.

belangrijke punten:

* Het proces van DNA -isolatie en visualisatie kan worden geoptimaliseerd op basis van het celtype en de beoogde toepassing.

* Verschillende technieken en reagentia kunnen worden gebruikt, afhankelijk van de specifieke experimentele vereisten.

* Visualisatie kan ook worden verbeterd met behulp van kleurtechnieken, zoals het gebruik van een kleurstof zoals ethidiumbromide, die bindt aan DNA en het fluoresce maakt onder UV -licht.

Door het proces van DNA -neerslag en visualisatie te begrijpen, kunt u DNA effectief isoleren en analyseren uit verschillende bronnen.