Science >> Wetenschap >  >> Biologie

Wat is LB -plaat bij het maken van competente cellen?

Een LB-plaat, of Luria-Bertani Agar-plaat , is een cruciale component in het proces van het maken van competente cellen. Het dient twee hoofddoelen:

1. Groeimedium: LB Agar biedt een voedingsrijke omgeving voor bacteriën om te groeien en te vermenigvuldigen. Het bevat essentiële voedingsstoffen zoals tryptone, gistextract en natriumchloride, die bacteriegroei en deling ondersteunen.

2. Selectie en identificatie: LB -platen kunnen worden aangevuld met specifieke antibiotica, zoals ampicilline of kanamycine. Dit zorgt voor de selectie van bacteriekolonies die zijn getransformeerd met een plasmide dat het antibioticaresistentiegen bevat. Alleen de bacteriën die het plasmide dragen, zullen overleven op de antibiotica-bevattende LB-plaat, waardoor de identificatie van succesvol getransformeerde cellen mogelijk is.

In het proces van het maken van competente cellen worden LB -platen gebruikt voor:

* Groeiende bacteriën: De startbacteriën worden eerst op LB -platen geteeld om een ​​groot aantal cellen te verkrijgen.

* Selectie van getransformeerde cellen: Na transformatie worden de bacteriën uitgeplaat op LB -platen die het juiste antibioticum bevatten. Alleen de getransformeerde cellen die het resistentiegen dragen, zullen groeien en kolonies vormen.

Belangrijke aspecten van LB -platen bij het maken van competente cellen:

* Samenstelling: LB -agar bevat meestal 1% tryptone, 0,5% gistextract, 1% NaCl en 1,5% agar.

* Temperatuur: LB -platen worden meestal geïncubeerd bij 37 ° C, de optimale temperatuur voor bacteriegroei.

* Selectie van antibiotica: Het specifieke gebruikte antibioticum hangt af van het plasmide dat wordt gebruikt voor transformatie.

* kolonievorming: Na incubatie vormen getransformeerde bacteriën zichtbare kolonies op de LB -plaat, die vervolgens verder kunnen worden geanalyseerd.

Samenvattend: LB -platen bieden een geschikt medium voor bacteriegroei en zorgen voor de selectie van getransformeerde cellen op basis van antibioticaresistentie. Ze zijn een essentieel hulpmiddel bij het maken van competente cellen voor genklonen en andere moleculaire biologietechnieken.