Hier is de uitsplitsing:

1. Verlichting:

* wit licht is de primaire verlichtingsbron in de meeste optische microscopen, inclusief fluorescentiemicroscopen. Het verlicht het monster dat wordt bekeken.

2. Fluorescentie:

* In fluorescentiemicroscopie , specifieke kleurstoffen (fluoroforen genoemd) worden gebruikt om het monster te labelen. Deze kleurstoffen stoten licht uit van een specifieke kleur wanneer het wordt opgewonden door het licht van een andere kleur.

* blauw licht wordt vaak gebruikt om groene fluorescerende eiwitten (GFP) te opwinden , die vaak worden gebruikt als genetische markers.

* rood licht wordt vaak gebruikt om rode fluorescerende eiwitten (RFP) te opwinden of andere kleurstoffen die rode fluorescentie uitzenden.

3. Filters:

* De microscoop gebruikt filters om het excitatielicht te scheiden van de uitgezonden fluorescentie.

* excitatiefilter: Dit filter maakt alleen de specifieke golflengte van licht mogelijk die de fluorofoor opwindt om door te gaan.

* emissiefilter: Met dit filter kan alleen de specifieke golflengte van het licht dat door de fluorofoor wordt uitgezonden, de waarnemer bereiken.

Hier is hoe het werkt:

1. excitatie: Blauw licht wordt op het monster gericht en opwindend de GFP -moleculen in het monster.

2. emissie: De opgewonden GFP -moleculen stralen groen licht uit.

3. filteren: Het rode excitatielampje wordt geblokkeerd door een emissiefilter, waardoor alleen de groene fluorescentie het oog van de waarnemer of de camera kan bereiken.

Waarom blauw en rood gebruiken?

* verschillende kleuren: Blauw en rood licht worden gekozen voor hun verschillende golflengten, waardoor ze verschillende fluoroforen kunnen opwinden en detecteren. Dit zorgt voor de visualisatie van meerdere doelen binnen een enkel monster.

* Spectrale scheiding: Blauw en rood licht liggen relatief ver uit elkaar op het elektromagnetische spectrum, waardoor het gemakkelijker is om ongewenste golflengten uit te filteren en de specifieke fluorescentie te isoleren.

Samenvattend:

* Blauw en rood licht worden gebruikt in fluorescentiemicroscopie om verschillende fluoroforen te prikkelen, maar niet als de primaire verlichtingsbron.

* Filters zijn essentieel om het excitatielicht te scheiden van de uitgezonden fluorescentie, waardoor de visualisatie van specifieke doelen binnen een monster mogelijk wordt.