Volgens het Amerikaanse Environmental Protection Agency wordt LC50 gedefinieerd als de concentratie van een chemische stof in lucht of water waarvan wordt verwacht dat deze de dood veroorzaakt bij 50 procent van de proefdieren die in die lucht of water leven. Bij testen die meestal op muizen of ratten worden uitgevoerd, sterft 50 procent van de proefdieren op het LC50-niveau na één blootstelling. Testen uitgevoerd om de LC50-waarden te bepalen, geven aan welk dier in de test wordt gebruikt. Hoewel toxiciteitstests op muizen en ratten zich niet altijd naar mensen uitstrekken, is de LC50-waarde belangrijk en wordt het veilig geacht als mensen in het materiaal werken.

Schrijf uw testnormen op met welk dier zal worden getest, hoeveel dieren in elke testgroep aanwezig zijn, welke concentraties van de chemische stof zullen worden getest en de blootstellingsduur.

Onderwerp van een groep proefdieren voor één concentratie van de chemische stof in een gecontroleerde laboratoriumomgeving . Ga door tot alle groepen, met uitzondering van de controlegroep, worden onderworpen aan een van elke verschillende concentratie van de chemische stof.

Definieer de LC50-waarde als de laagste concentratie van de chemische stof, in delen per miljoen (ppm), waarbij minimaal 50 procent van de proefdieren sterft.