Wetenschap
1. Tracking Dye:
* Met deze component kunt u de voortgang van de elektroforese visueel volgen.
* Het is een gekleurde kleurstof die in een voorspelbaar tempo door de gel migreert.
* Gemeenschappelijke voorbeelden zijn:
* Bromophenol Blue: Migreert met een vergelijkbare snelheid als een fragment van 300-400 bp van DNA.
* xyleencyanol ff: Migreert met een vergelijkbare snelheid als een 4-6 kb-fragment van DNA.
2. Glycerol/sucrose:
* Deze component maakt het monster dichter dan de bufferoplossing, zodat het in de put zinkt en niet diffundeert.
* Dit zorgt ervoor dat het monster correct wordt geladen en blijft geconcentreerd aan de onderkant van de put.
3. Buffers:
* Deze componenten helpen om de pH van de monster- en bufferoplossing tijdens elektroforese te handhaven.
* Ze zorgen voor de juiste functie van de enzymen die bij het proces betrokken zijn.
* Voorbeelden zijn Tris-Borate-EDTA (TBE) of Tris-Acetate-EDTA (TAE) -buffers.
4. Andere additieven (optioneel):
* SDS (natriumdodecylsulfaat): Dit wasmiddel wordt vaak toegevoegd aan eiwitmonsters om ze te denatureren en te bedekken met een negatieve lading, waardoor ze kunnen migreren op basis van hun grootte.
* Reducerende middelen: Zoals dithiothreitol (DTT) of β-mercaptoethanol, worden soms toegevoegd om disulfidebindingen in eiwitten te verbreken, waardoor ze verder worden aangedaan.
Belangrijke punten om te onthouden:
* De specifieke samenstelling van laadverf kan variëren, afhankelijk van het type elektroforese dat wordt uitgevoerd (DNA, RNA of eiwit).
* De keuze voor het bijhouden van kleurstof moet geschikt zijn voor het groottebereik van de moleculen die worden geanalyseerd.
* Het laden van kleurstof moet spaarzaam worden gebruikt om te voorkomen dat te veel volume in de putten wordt geïntroduceerd, wat de bandresolutie kan beïnvloeden.
Laat het me weten als je nog andere vragen hebt!
Wetenschap © https://nl.scienceaq.com