Science >> Wetenschap & Ontdekkingen >  >> Biologie

Bacteriële transformatie:hoe recombinante plasmiden cellen binnendringen

Een recombinant plasmide komt in een bacteriële cel terecht via een proces dat transformatie wordt genoemd .

Hier is een overzicht:

1. Voorbereiding: Bacteriële cellen worden behandeld met een oplossing die hun celwanden beter doorlaatbaar maakt. Vaak gebeurt dit met calciumchloride, dat ervoor zorgt dat het DNA de cel binnenkomt.

2. Inleiding: Het recombinante plasmide-DNA wordt vervolgens aan de bereide bacteriecellen toegevoegd. Het plasmide-DNA kan op verschillende manieren worden geïntroduceerd, waaronder:

* Hitteschok: De cellen en het plasmide-DNA worden gemengd en vervolgens onderworpen aan een korte hitteschok, waardoor het DNA de cellen kan binnendringen.

* Elektroporatie: Er wordt een korte elektrische puls op de cellen toegepast, waardoor tijdelijke poriën in het celmembraan ontstaan waardoor het plasmide kan binnendringen.

3. Transformatie: Zodra het plasmide zich in de cel bevindt, kunnen de bacteriën het DNA opnemen en in hun eigen genoom inbouwen. Dit proces heet transformatie.

4. Selectie: De getransformeerde bacteriën worden vervolgens geselecteerd met behulp van een techniek die antibioticaselectie wordt genoemd. De plasmiden bevatten doorgaans een gen voor antibioticaresistentie, dus alleen bacteriën die het plasmide hebben opgenomen, kunnen groeien op een medium dat het antibioticum bevat.

Met dit proces kunnen onderzoekers specifieke genen in bacteriën introduceren, waardoor ze onder andere de gewenste eiwitten of verbindingen kunnen produceren.