Bacteriën cultiveren:een stapsgewijze gids

Het cultiveren van bacteriën, ook bekend als microbiële cultuur, is een fundamentele praktijk in de microbiologie, die worden gebruikt voor verschillende doeleinden zoals onderzoek, diagnose en industriële productie. Hier is een vereenvoudigde gids voor het cultiveren van bacteriën:

1. De juiste media selecteren:

* typen: Verschillende bacteriën vereisen specifieke voedingssamenstellingen. Veel voorkomende media zijn onder meer:

* Agar -platen: Solide media met agar, een stollingsmiddel, waardoor kolonievorming mogelijk is.

* bouillon: Vloeibare media, geschikt voor het kweken van grote hoeveelheden bacteriën.

* selectieve media: Bevat specifieke voedingsstoffen en remmers om te selecteren voor specifieke bacterietypen.

* Differentiële media: Zorgt voor onderscheid tussen verschillende soorten bacteriën op basis van hun groeimannen.

* Voorbereiding: Bereid de media zorgvuldig voor op basis van de instructies van fabrikanten om optimale groeiomstandigheden te garanderen.

2. Sterilisatie:

* waarom: Essentieel om alle bestaande micro-organismen te elimineren die de cultuur kunnen besmetten.

* Methoden:

* autoclaaf: Gebruikt hoge druk en temperatuur om media, glaswerk en andere materialen te steriliseren.

* filtersterilisatie: Gebruikt voor warmtegevoelige oplossingen en passeer ze door een filter met poriën die klein genoeg zijn om bacteriën te vangen.

3. Inoculatie:

* Doel: Introductie van een monster dat bacteriën in het steriele medium bevat.

* Methoden:

* strepen: Een steriele lus gebruiken om bacteriën op een agarplaat te verspreiden, waardoor individuele kolonies worden gecreëerd.

* Gietplaten: Bacteriën mengen met gesmolten agar voordat ze in petrischalen gieten.

* vloeibare inoculatie: Direct bacteriën toevoegen aan vloeibare bouillon.

4. Incubatie:

* Temperatuur: Elke bacteriesoort heeft een optimaal temperatuurbereik voor groei.

* tijd: Hangt af van het type bacteriën en de doelstellingen van het experiment.

* sfeer: Sommige bacteriën vereisen specifieke atmosferische aandoeningen, zoals anaërobe of micro -schaapjes omgevingen.

5. Monitoring en observatie:

* Groei: Monitor voor zichtbare tekenen van bacteriegroei, zoals troebelheid in bouillon- of kolonievorming op agarplaten.

* Microscopie: Onderzoek de bacteriële morfologie onder een microscoop om hun identiteit te bevestigen.

* Biochemische tests: Voer specifieke tests uit om de bacteriën te identificeren en te karakteriseren.

6. Opslag en verwijdering:

* opslag: Bewaar culturen goed voor toekomstig gebruik, meestal in koelkasten of bij -80 ° C.

* Verwijdering: Gooi op verantwoorde wijze van bacterieculturen, na laboratoriumveiligheidsprotocollen.

Belangrijkste overwegingen:

* aseptische techniek: Het handhaven van steriliteit gedurende het hele proces is cruciaal om verontreiniging te voorkomen.

* Veiligheid: Werk met bacteriën in een kabinet voor bioveiligheid om uzelf en het milieu te beschermen tegen mogelijke gevaren.

* Documentatie: Noteer alle stappen en observaties grondig om reproduceerbaarheid en traceerbaarheid te waarborgen.

Verdere bronnen:

* Microbiology Textbooks: Geef gedetailleerde informatie over bacteriële technieken.

* Laboratoriumhandleidingen: Bevatten specifieke protocollen voor het cultiveren van verschillende bacteriën.

* online bronnen: Talloze websites en databases bieden informatie over bacteriële cultuur en identificatie.

Vergeet niet dat het cultiveren van bacteriën zorgvuldige aandacht vereist voor detail en naleving van veiligheidsrichtlijnen.