* Beperkingsenzymen: Deze enzymen werken als moleculaire schaar en snijden DNA op specifieke sequenties die restrictieplaatsen worden genoemd. Ze creëren plakkerige uiteinden, die korte, enkelstrengige overhangen zijn die kunnen baseren met complementaire sequenties.

* Ligase -enzymen: Deze enzymen werken als moleculaire lijm en verbinden de plakkerige uiteinden van twee verschillende DNA -fragmenten samen. Ze vormen fosfodiester-bindingen tussen de suiker-fosfaatbackbones van de DNA-fragmenten, waardoor een continu DNA-molecuul ontstaat.

Samenvattend: Beperkingsenzymen snijden het DNA en ligase -enzymen sluiten zich aan bij de stukken. Dit proces maakt het mogelijk om een gen van interesse in een vector in te voegen, waardoor recombinant DNA wordt gecreëerd.